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基因工程與?工程綜合實驗教程(新工科高等院校工程實踐類教材)

作者：編者:俞海洋//彭浩//喬洪金|責編:周娟
出版社：東南大學
ISBN：9787576624687

出版日期：2025/12/01
裝幀：平裝
頁數：98

人民幣：RMB 35 元售價：元

內容大鋼

本書在內容架構上創新性地打破了學科壁壘，以α-澱粉?基因的全鏈條研究為主線，系統整合了兩大技術體系的核心模塊。通過「基因操作→蛋白表達→功能驗證」的遞進式實驗設計，將基因工程領域的「DNA 提取→限制性?切→載體構建→轉化篩選→誘導表達」與?工程領域的「蛋白提取純化→?活檢測體系建立→底物特異性分析→動力學參數測定」等關鍵技術模塊進行有機銜接。這種一體化的項目設計既完整呈現了基因工程技術的操作流程，又深度融入了?工程的應用導向特色，通過對α-澱粉?這一典型案例的全生命周期研究，構建起「基因序列解析→重組質粒構建→工程菌發酵→目標蛋白純化→?學性質表徵」的完整技術鏈條。學生通過參與該項目，不僅能系統掌握分子克隆、蛋白純化等核心技術，更能在實踐中建立「基因功能→蛋白結構→催化特性」的三維認知框架，顯著提升跨學科實驗設計能力與生物技術產業化思維。
本教程適用於生物技術、生物工程及相關專業的本科生和研究生實驗教學，也可作為科研人員開展分子生物學實驗的技術參考。

作者介紹

編者:俞海洋//彭浩//喬洪金|責編:周娟

實驗一大腸桿菌感受態細胞的製備（Ca2+誘導法）
實驗二解澱粉芽孢桿菌基因組DNA的提取（CTAB法）
實驗三 α-澱粉?（α-amylase）基因的PCR克隆
實驗四 α-澱粉?基因的回收與純化（硅膠膜離心柱法）
實驗五 α-澱粉?基因與克隆載體的連接和轉化
實驗六 α-澱粉?基因陽性克隆的菌落PCR驗證與測序
實驗七 α-澱粉?基因克隆載體的提取（鹼裂解法）和雙?切
實驗八目的基因膠回收純化（柱式法）和表達載體的連接
實驗九重組表達載體（pET21a-α-amylase）的轉化及陽性克隆的鑒定
實驗十產α-澱粉?工程菌的培養及誘導表達
實驗十一 α-澱粉?蛋白基因表達產物的檢測分析（SDS-PAGE）
實驗十二 α-澱粉?的粗提（透析法）
實驗十三 α-澱粉?蛋白濃度測定（Folin-酚試劑法）
實驗十四 α-澱粉??活檢測（DNS法、碘-澱粉比色法）
實驗十五 α-澱粉?的底物特異性測定（DNS法）
實驗十六 α-澱粉??促動力學檢測
實驗十七 pH對α-澱粉??活力的影響
實驗十八溫度對α-澱粉??活力的影響
實驗十九金屬離子對α-澱粉?活力的影響
實驗二十 α-澱粉?水解產物的薄層層析
實驗二十一人工智慧在α-澱粉?蛋白質結構和功能預測及分子設計中的應用
參考文獻
附錄：芽孢桿菌B-5型α-澱粉?基因序列

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