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高級生物化學實驗技術(科學出版社十四五普通高等教育本科規劃教材)

  • 作者：編者:史影//周耐明//江輝//徐良|責編:劉暢//韓書雲
  • 出版社：科學
  • ISBN：9787030857675
  • 出版日期：2026/06/01
  • 裝幀：平裝
  • 頁數：205
人民幣：RMB 69 元      售價：元
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內容大鋼
    本教材是浙江大學國家級一流課程「G蛋白偶聯受體FPR1全基因克隆、真核表達和功能測定虛擬模擬實驗」及省級一流課程「高級生物化學」的配套教材，圍繞現代生物化學研究的主要方法及現階段科研實驗室常用實驗技術展開，分理論和實驗兩部分。理論部分系統闡述目前生物化學研究的常用實驗技術與方法，包括常用報告基因與標籤蛋白、常用表達載體與質粒導入技術、蛋白質檢測技術、細胞內化學信使檢測技術、蛋白質相互作用研究技術、蛋白質與核酸相互作用研究技術、熒光探針與熒光檢測技術、高效液相色譜法和生物質譜，並穿插上述科學技術的概況與發展歷史及這些技術在現代生物學實驗中的應用案例。與理論部分相呼應，實驗部分包括12個科研轉化型綜合實驗，串聯生物信息學、分子生物學、細胞生物學和生物化學等重要知識點，介紹經典的研究策略、技術路線及新實驗技術體系，將基本實驗技能和科學研究思路相結合，並進一步提出拓展性思考。同時實驗部分還為師生提供了「實驗安排」和「開放性探索」等環節。本教材配套的虛擬模擬實驗在國家高等教育智慧教育平台及實驗空間上線共享，同時也提供了虛擬模擬實驗視頻和實體操作視頻等數字化資源。
    本教材適合生物科學類、醫學、農學、生物工程類、環境工程類等專業的高等院校本科生和研究生、高校教師，以及相關企業的科技人員使用。
作者介紹
編者:史影//周耐明//江輝//徐良|責編:劉暢//韓書雲
目錄
第一部分  常用生物化學實驗技術與方法
  第一章  常用報告基因與標籤蛋白
    第一節  報告基因的類型
      一、β-半乳糖??
      二、氯黴素乙?轉移?
      三、螢光素?
      四、熒光蛋白
      五、分泌型鹼性磷酸?
      六、β-葡萄糖?酸?
    第二節  報告基因的實踐應用
      一、報告基因法檢測信號通路和藥物活性
      二、報告基因法用於高通量測定的細菌生物報告晶元
      三、報告基因用於蛋白質標記示蹤和相互作用研究
      四、報告基因在分子成像中的應用
    第三節  常用標籤蛋白
      一、GST標籤蛋白
      二、His 6標籤蛋白
      三、MBP標籤蛋白
      四、Flag標籤蛋白
      五、SUMO標籤蛋白
      六、HA標籤蛋白
      七、Myc標籤蛋白
      八、Avi標籤蛋白
      九、V5標籤蛋白
      十、Halo標籤蛋白
      十一、降解標籤蛋白
      十二、其他多?標籤蛋白
  第二章  常用表達載體與質粒導入技術
    第一節  原核表達載體
      一、原核表達載體的核心元件
      二、常用原核表達載體舉例
    第二節  真核表達載體
      一、真核表達載體核心元件
      二、常用真核表達載體舉例
    第三節  質粒導入技術
      一、轉化
      二、轉導
      三、轉染
      四、電轉化
  第三章  蛋白質檢測技術
    第一節  蛋白質含量測定常用方法
      一、Lowry法
      二、BCA法
      三、考馬斯亮藍法
    第二節  蛋白質印跡技術
      一、蛋白質印跡技術的原理
      二、蛋白質印跡實驗一般流程及其操作
      三、蛋白質印跡技術分析蛋白質的常見應用
    第三節  ?聯免疫吸附測定技術
      一、?聯免疫吸附測定技術的原理

      二、?聯免疫吸附測定技術的種類
      三、?聯免疫吸附測定實驗一般流程
      四、?聯免疫吸附測定技術檢測蛋白質的常見應用
  第四章  細胞內化學信使檢測技術
    第一節  cAMP檢測技術
      一、?聯免疫吸附測定法
      二、報告基因間接檢測法
    第二節  Ca2＋檢測技術
      一、合成熒光探針檢測Ca2＋動員
      二、發光蛋白檢測Ca2＋動員
      三、基因編碼鈣離子探針檢測Ca2＋動員
      四、Ca2＋檢測技術的應用
  第五章  蛋白質相互作用研究技術
    第一節  免疫共沉澱技術
      一、免疫共沉澱技術的基本原理
      二、免疫共沉澱實驗的一般流程
      三、免疫共沉澱技術的應用舉例
    第二節  pull-down技術
      一、pull-down技術的基本原理
      二、pull-down實驗的一般流程
      三、pull-down技術的應用舉例
    第三節  蛋白質片段互補分析技術
      一、雙分子熒光互補技術
      二、NanoBiT蛋白質互補技術
    第四節  共振能量轉移技術
      一、熒光共振能量轉移技術
      二、生物發光共振能量轉移技術
    第五節  酵母雙雜交技術
      一、酵母雙雜交技術的基本原理
      二、酵母雙雜交實驗的一般流程
      三、酵母雙雜交技術的應用舉例
  第六章  蛋白質與核酸相互作用研究技術
    第一節  染色質免疫沉澱技術
      一、染色質免疫沉澱技術的基本原理
      二、染色質免疫沉澱實驗的一般流程
      三、染色質免疫沉澱技術的應用舉例
    第二節  RNA免疫沉澱技術
      一、RNA免疫沉澱技術的基本原理
      二、RNA免疫沉澱實驗的一般流程
      三、RNA免疫沉澱技術的應用舉例
    第三節  核酸pull-down技術
      一、核酸pull-down技術的基本原理
      二、核酸pull-down實驗的一般流程
      三、核酸pull-down技術的應用舉例
  第七章  熒光探針與熒光檢測技術
    第一節  熒光探針的原理和常見種類
      一、熒光探針的基本原理
      二、影響熒光探針性質的相關因素
      三、熒光探針的選擇依據
      四、常見的熒光探針

    第二節  熒光檢測技術
      一、激光掃描共聚焦顯微鏡技術
      二、流式細胞術
      三、活體動物熒光成像技術
  第八章  高效液相色譜法
    第一節  高效液相色譜法的特點
    第二節  高效液相色譜法的分類
      一、吸附色譜法
      二、分配色譜法
      三、鍵合相色譜法
      四、離子對色譜法
      五、超高效液相色譜法
      六、離子交換色譜法
      七、體積排阻色譜法
      八、親和色譜法
    第三節  高效液相色譜儀的基本裝置
      一、流動相及儲液罐
      二、高壓輸液泵及梯度洗脫裝置
      三、進樣器
      四、色譜柱
      五、檢測器
      六、收集器
      七、工作站
    第四節  高效液相色譜法的應用
      一、天然產物的檢測
      二、蛋白質翻譯后修飾的分析
  第九章  生物質譜
    第一節  質譜概述
      一、質譜儀的基本裝置
      二、質譜圖的含義
      三、串聯質譜
      四、質譜與色譜聯用
    第二節  生物質譜的基本原理
      一、電噴霧質譜
      二、基質輔助激光解吸質譜
    第三節  生物質譜在定性研究中的應用
      一、?質量指紋圖譜鑒定蛋白質
      二、串聯質譜測定蛋白質序列
      三、b、y系列離子的區分方法
    第四節  生物質譜在標記法定量研究中的應用
      一、體內標記
      二、體外標記
      三、等重同位素標籤相對和絕對定量法
    第五節  生物質譜在非標記法定量研究中的應用
      一、質譜離子信號強度定量法
      二、串聯質譜計數定量法
第二部分  高級生物化學實驗
  實驗一  基因結構分析
  實驗二  FPR1全基因克隆與真核表達質粒的構建
  實驗三  GPCR的膜定位和激活后內吞的觀察

  實驗四  FPR1介導的細胞趨化作用研究
  實驗五  轉錄增強因子在DNA轉錄中的調控作用
  實驗六  Fura-2法測定細胞內Ca2＋濃度變化
  實驗七  ERK1/2蛋白磷酸化及信號通路活化的檢測
  實驗八  NanoBiT技術檢測GPCR介導的偏向性信號通路
  實驗九  甲醛交聯法染色質免疫沉澱技術
  實驗十  RNA免疫沉澱技術檢測RNA與蛋白質的相互作用
  實驗十一  口服五維賴氨酸葡萄糖中6種活性成分的定性定量分析
  實驗十二  應用定量蛋白質組學技術篩選小鼠肝癌淋巴道轉移標誌物

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