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山新楊PdbNAC17基因耐鹽和次生壁形成的分子機制

  • 作者：國會艷|責編:周凱麗
  • 出版社：東北大學
  • ISBN：9787551735605
  • 出版日期：2024/09/01
  • 裝幀：平裝
  • 頁數：131
人民幣：RMB 59 元      售價：元
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內容大鋼
    本書主要研究了山新楊的NAC轉錄因子PdbNAC17的表達模式、在鹽脅迫及次生細胞壁形成中的功能及其分子機制。第1章介紹了鹽脅迫對植物的危害及植物響應鹽脅迫的機制，並概述了NAC轉錄因子在植物生長發育及響應生物和非生物脅迫中的作用及其調控機制；第2章研究了PdbNAC17轉錄因子的組織表達特異性和在鹽脅迫下的表達模式，並分析其作為轉錄因子的亞細胞定位情況；第3章通過構建PdbNAC17基因的過表達和敲除載體，研究該基因在山新楊耐鹽和次生壁形成中的功能；第4章研究了PdbNAC17轉錄因子的轉錄激活結構域，並通過酵母雙雜交獲得與其互作的同源蛋白；第5章通過RNA-seq技術研究了PdbNAC17轉錄因子在鹽脅迫和次生壁形成中調控的差異表達基因；第6章通過轉錄因子為中心的酵母單雜交以及酵母單雜交和染色質免疫共沉澱等技術研究了PdbNAC17轉錄因子結合的順式作用元件。
作者介紹
國會艷|責編:周凱麗
目錄
第1章  緒論
  1.1  鹽脅迫對植物的危害
  1.2  植物響應鹽脅迫的機制
  1.3  NAC轉錄因子的研究進展
    1.3.1  NAC轉錄因子簡介
    1.3.2  NAC轉錄因子的功能分析
    1.3.3  NAC轉錄因子的耐鹽調控機制
    1.3.4  次生壁生長相關NAC轉錄因子的調控機制
  1.4  研究目的及意義
第2章  山新楊PdbNAC17基因的表達分析和亞細胞定位
  2.1  實驗材料
    2.1.1  植物材料
    2.1.2  藥品及培養基的配製
  2.2  實驗方法
    2.2.1  山新楊的培養
    2.2.2  PdbNAC17基因在山新楊不同組織部位中的表達分析
    2.2.3  PdbNAC17基因在鹽脅迫處理山新楊中的表達分析
    2.2.4  PdbNAC17的亞細胞定位分析
  2.3  結果與分析
    2.3.1  PdbNAC17基因在山新楊不同組織中的表達分析
    2.3.2  PdbNAC17基因在鹽脅迫處理山新楊中的表達分析
    2.3.3  山新楊pBI121-PdbNAC17-GFP表達載體的構建
    2.3.4  PdbNAC17的亞細胞定位分析
  2.4  討論
    2.4.1  PdbNAC17基因的表達分析
    2.4.2  PdbNAC17轉錄因子的亞細胞定位
  2.5  本章小結
第3章  山新楊PdbNAC17基因的功能研究
  3.1  實驗材料
    3.1.1  植物材料
    3.1.2  菌種及載體
    3.1.3  藥品及培養基配製
  3.2  實驗方法
    3.2.1  山新楊PdbNAC17基因的過表達載體構建
    3.2.2  山新楊PdbNAC17基因編輯載體的構建
    3.2.3  山新楊PdbNAC17基因工程菌的製備
    3.2.4  山新楊的穩定遺傳轉化
    3.2.5  轉基因山新楊株系的鑒定
    3.2.6  PdbNAC17基因在該基因過表達山新楊中的表達量分析
    3.2.7  PdbNAC17基因編輯測序結果分析
    3.2.8  PdbNAC17基因的耐鹽能力分析
    3.2.9  鹽脅迫下抗逆基因在PdbNAC17轉基因山新楊中的表達
    3.2.10  PdbNAC17基因在山新楊木質部發育中的功能
  3.3  結果與分析
    3.3.1  山新楊PdbNAC17基因過表達載體構建及工程菌製備
    3.3.2  山新楊PdbNAC17基因編輯載體構建及工程菌製備
    3.3.3  山新楊抗性苗的獲得
    3.3.4  轉基因株系的鑒定
    3.3.5  PdbNAC17基因的耐鹽能力分析
    3.3.6  鹽脅迫下抗逆相關基因在PdbNAC17轉基因山新楊中的表達分析

    3.3.7  PdbNAC17基因在山新楊木質部發育中的功能分析
  3.4  討論
    3.4.1  PdbNAC17基因的耐鹽及次生壁形成的功能分析
    3.4.2  PdbNAC17基因的耐鹽調控機制分析
  3.5  本章小結
第4章  山新楊PdbNAC17轉錄激活結構域的確定及與同源蛋白的互作分析
  4.1  實驗材料
    4.1.1  菌種及載體
    4.1.2  藥品及培養基的配製
  4.2  實驗方法
    4.2.1  山新楊pGBKT7-PdbNAC17酵母表達載體構建
    4.2.2  山新楊PdbNAC17轉錄激活結構域的確定
    4.2.3  山新楊PdbNAC17與同源蛋白的載體構建
  4.3  結果與分析
    4.3.1  山新楊pGBKT7-PdbNAC17全長及分區段的載體構建
    4.3.2  山新楊PdbNAC17轉錄激活結構域分析
  4-3.3  山新楊PdbNAC17與同源蛋白的互作分析
  4.4  討論
  4.5  本章小結
第5章  鹽脅迫下PdbNAC17轉基因山新楊的RNA-seq分析
  5.1  實驗材料
  5.2  實驗方法
    5.2.1  山新楊苗的處理
    5.2.2  數據處理與測序評估
    5.2.3  參考基因組的序列比對
    5.2.4  差異基因的分析
    5.2.5  qRT—PCR方法驗證表達譜測序結果
  5.3  結果與分析
    5.3.1  轉錄組測序質量評估與參考基因組比對
    5.3.2  差異表達基因的分析
    5.3.3  差異基因的G0分析
    5.3.4  差異基因的COG分析
    5.3.5  差異基因的KEGG分析
    5.3.6  qRT-PCR方法驗證表達譜測序結果
    5.3.7  差異基因的聚類分析
  5.4  本章討論
  5.5  本章小結
第6章  山新楊PdbNAC17識別順式作用元件的研究
  6.1  實驗材料
    6.1.1  菌種及載體
    6.1.2  藥品的配製
    6.1.3  培養基的配製
  6.2  實驗方法
    6.2.1  山新楊pGADT7-Rec2-PdbNAC17效應載體的構建
    6.2.2  PdbNAC17與隨機元件庫的酵母單雜交分析
    6.2.3  未知元件核心序列的確定
    6.2.4  未知元件核心序列的突變分析
    6.2.5  山新楊PdbNAC17-Flag的過表達載體構建
    6.2.6  山新楊PdbNAC17-Flag基因工程茵的製備
    6.2.7  山新楊的穩定遺傳轉化

    6.2.8  轉基因山新楊株系的鑒定
    6.2.9  PdbNAC17基因在過表達轉基因山新楊中的表達量分析
    6.2.10  ChIP驗證
  6.3  結果與分析
    6.3.1  山新楊pGADT7-Rec2-PdbNAC17載體構建
    6.3.2  PdbNACJ7與隨機元件庫的酵母單雜交
    6.3.3  未知元件核心序列的獲得
    6.3.4  pGADT7-Rec2-PdbNAC17與pHIS2-DNA的互作驗證
    6.3.5  PdbNAC17與順式作用元件的互作驗證
    6.3.6  山新楊PdbNAC17基因過表達載體的構建及工程菌的製備
    6.3.7  山新楊抗性苗的獲得與鑒定
    6.3.8  ChIP-PCR結果
  6.4  討論
  6.5  本章小結
參考文獻

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