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合成生物學基礎實驗原理與技術(大腸桿菌篇)

  • 作者:編者:牛福星//易弋|責編:王琰
  • 出版社:化學工業
  • ISBN:9787122458339
  • 出版日期:2024/11/01
  • 裝幀:平裝
  • 頁數:138
人民幣:RMB 39.8 元      售價:
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內容大鋼
    合成生物學是生命科學發展過程中產生的一門綜合性學科。其基本實驗技術主要涉及基因工程、代謝調控、基因編輯等。本書就合成生物學研究常用實驗對象——大腸桿菌進行系統性實驗設計。按照合成生物學基礎實驗流程:菌株的感受態製備、瓊脂糖凝膠的製備、核酸提取及驗證、工具?使用、載體構建、陽性轉化子篩選、蛋白質表達及鑒定以及基因編輯實驗流程進行編寫。同時設置了相關的思考題以幫助讀者進一步了解該實驗。
    書中對每一個實驗的原理進行了清晰的描述,書中所展示的實驗技術不同於傳統的分子生物學技術,而是對數個博士實驗常用技術改進並總結,包含更加便捷高效的實驗技巧。本教材適合作為高等學校合成生物學、生物工程等專業的實驗教材,也是初入合成生物學領域科研人員、教學工作人員不可多得的參考書。

作者介紹
編者:牛福星//易弋|責編:王琰

目錄
第一章  感受態細胞的快速製備及轉化
  第一節  感受態細胞的化學法快速製備
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
  第二節  利用熱激法製備的感受態細胞進行轉化
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
  第三節  感受態細胞的電轉化法快速製備
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
  第四節  利用電轉化法製備的感受態細胞進行轉化
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
第二章  PC R擴增及瓊脂糖凝膠核酸電泳技術
  第一節  常規PCR技術
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
  第二節  重疊延伸PCR技術
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
  第三節  定點突變PCR技術
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項

    六、思考題
  第四節  瓊脂糖凝膠核酸電泳技術
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
第三章  DNA提取
  第一節  大腸桿菌基因組的提取(機械破胞+柱法回收)
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
  第二節  質粒提取(鹼裂解+柱回收法)
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
  第三節  PCR產物回收(乙醇沉澱法)
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
  第四節  PCR產物/?切產物純化(柱提法)
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
第四章  工具?的使用以及載體構建
  第一節  限制性核酸?(印,7 1)的使用
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
  第二節  限制性核酸內切?的使用
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程

    五、注意事項
    六、思考題
  第三節  連接?的使用
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
  第四節  T載體構建
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
第五章  陽性轉化子的篩選與鑒定
  第一節  菌落PCR鑒定
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
  第二節  基於藍白斑篩選的載體構建
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
  第三節  基於熒光蛋白報告基因的載體構建和鑒定
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
  第四節  選取載體的重鑒定
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
第六章  蛋白質表達純化及鑒定
  第一節  蛋白質表達
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備

    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
  第二節  細胞收集與破碎
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
  第三節  蛋白質純化
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
  第四節  SDS—PAGE電泳
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
第七章  CRISPR技術應用
  第一節  CRISPR基因敲除
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
  第二節  CRISPR基因敲除驗證及質粒去除
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
  第三節  CRlSPR基因抑制
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備
    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
  第四節  CRISPR基因激活
    一、實驗目的
    二、實驗原理
    三、實驗材料、試劑與設備

    四、實驗流程
    五、注意事項
    六、思考題
附錄一  常用培養基配方
附錄二  常用限制性內切?
附錄三  思考題參考答案
參考文獻

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