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現代分子生物學技術及實驗技巧(第2版)(精)/生物實驗室系列

作者：編者:葉棋濃|責編:傅四周
出版社：化學工業
ISBN：9787122446589

出版日期：2024/07/01
裝幀：精裝
頁數：499

人民幣：RMB 199 元售價：元

內容大鋼

    本書一版廣受讀者歡迎。新版延續第一版內容特色，系統介紹現代分子生物學各種傳統和新型的實驗技術，涵蓋核酸提取技術、目的基因的獲取及鑒定技術、載體的構建與鑒定技術、細菌轉化與細菌轉染技術、外源基因表達的鑒定技術、報告基因分析技術、差異基因表達譜分析技術、蛋白質-核酸相互作用技術、蛋白質-蛋白質相互作用技術、微生物體內同源重組技術、轉基因動物技術、基因編輯技術、微RNA的構造及實驗技術、長鏈非編碼RNA研究實驗技術、非編碼RNA資料庫及在線分析工具等。
    新版增加了CRISPR基因編輯技術、長鏈非編碼RNA研究實驗技術等新內容，並對非編碼RNA資料庫及在線工具一章進行重寫。和一版一樣，實驗方案部分強調對實驗結果作具體分析，每個實驗結果都附圖（照片），圖中設陰陽性對照，對照圖對實驗結果進行詳細分析，使讀者對實驗結果一目瞭然，還指出了每個技術的難點和解決辦法。
    本書是生物、醫學領域相關實驗室的案頭實驗操作工具書，可供從事生命科學研究和教育的碩士、博士等科技工作者和教學一線教師日常查閱參考。

作者介紹

編者:葉棋濃|責編:傅四周
葉棋濃，軍事科學院軍事醫學研究院某所科技委主任，研究員，博士生導師。國家傑出青年科學基金獲得者，享受國務院特殊津貼。中國生物工程學會副秘書長、中國生物工程學會醫學生物技術專業委員會主任委員、中國分析測試協會標記免疫分析專業委員會副主任委員。Frontiers in Cell and Developmental Biology和Frontiers in Oncology雜誌副主編，Science Bulletin雜誌特邀編委。主要從事腫瘤發生、侵襲、轉移、耐葯相關基因功能及機制研究，發現了新的調控重要信號轉導通路的基因和非編碼RNA，為腫瘤的診斷和治療提供候選靶標。以通訊作者在Cancer Cell、Nature Communications、Science Advances、Journal of Clinical Investigation、Advanced Science、Science Bulletin、STTT等SCI雜誌上發表文章90余篇。獲北京市科學技術一等獎1項，軍隊科技進步二等獎1項。

第一章  分子生物學技術概述
  一、引言
  二、目的基因的獲取
  三、克隆載體的選擇
  四、載體的轉化
  五、重組子的篩選
  六、基因表達
  七、生物工程技術的應用
  參考文獻
第二章  核酸提取技術
  第一節  質粒DNA的提取
    一、引言
    二、鹼裂解法小量質粒提取所需的儀器、材料及基本步驟
    三、Promega質粒DNA小量提取試劑盒操作程序
    四、注意事項
    五、實驗結果說明
    六、疑難解析
  第二節  基因組DNA的提取
    一、引言
    二、從植物組織提取基因組DNA
    三、從動物組織提取基因組DNA
    四、細菌基因組DNA的製備
    五、用DNA提取試劑盒從全血和組織中提取基因組DNA
    六、注意事項
    七、實驗結果說明
    八、疑難解析
  第三節  RNA的提取
    一、引言
    二、實驗設計思路和基本步驟
    三、實驗結果說明
    四、疑難解析
  參考文獻
第三章  目的基因的獲取及鑒定技術
  第一節  普通PCR
    一、普通PCR的基本概念和原理
    二、普通PCR技術的實驗方法
    三、疑難解析
  第二節  實時熒光定量PCR
    一、實時熒光定量PCR的基本概念和原理
    二、實時熒光定量PCR的定量方法
    三、實時熒光定量PCR的實驗方法
    四、實時熒光定量PCR技術的應用
    五、疑難解析
  第三節  環介導等溫擴增法快速檢測病原菌
    一、引言
    二、環介導等溫核酸擴增的原理
    三、實驗設計思路和基本步驟
    四、實驗結果
    五、疑難解析
    六、小結

  參考文獻
第四章  載體的構建和鑒定
  第一節  克隆載體
    一、pBR322載體
    二、pUC8——一種Lac選擇型質粒
    三、pGEM3Z——克隆DNA的體外轉錄
    四、柯斯質粒載體
  第二節  表達載體
    一、原核表達載體
    二、真核表達載體
  第三節  載體構建中的關鍵工具和步驟
    一、關鍵工具
    二、常規克隆關鍵步驟
    三、同源重組克隆關鍵步驟
  第四節  載體構建的應用舉例
    一、常規克隆實驗材料
    二、常規克隆實驗方法
    三、同源重組克隆實驗材料
    四、同源重組克隆實驗方法
    五、疑難問題解析
  參考文獻
第五章  細菌轉化與細胞轉染技術
  第一節  細菌轉化
    一、基本原理
    二、實驗設計思路和基本步驟
    三、實驗結果及分析
    四、疑難解析
  第二節  細胞轉染
    一、基本原理
    二、實驗設計和基本步驟
    三、實驗結果及分析
    四、疑難解析
  參考文獻
第六章  外源基因表達的鑒定
  第一節  Northern Blot
    一、引言
    二、實驗設計思路和基本步驟
    三、實驗結果說明
    四、疑難解析
  第二節  RT-PCR
    一、引言
    二、實驗設計思路和基本步驟
    三、實驗結果說明
    四、疑難解析
  第三節  Western Blot
    一、引言
    二、實驗設計思路和基本步驟
    三、實驗結果說明
    四、疑難解析
  第四節  ELISA

    一、引言
    二、實驗設計思路和基本步驟
    三、實驗結果說明
    四、疑難解析
  參考文獻
第七章  報告基因分析
  第一節  報告基因的定義和種類
    一、報告基因的定義
    二、常用的報告基因
  第二節  應用報告基因分析基因的轉錄活性
    一、實驗原理
    二、實驗設計和基本步驟
    三、實驗結果分析
    四、疑難解析
  第三節  報告基因在動物活體成像中的應用
    一、實驗原理
    二、實驗設計和基本步驟
    三、實驗結果分析
    四、疑難解析
  參考文獻
第八章  差異基因表達譜分析
  第一節  基於雙向電泳技術的蛋白質組學分析
    一、引言
    二、實驗基本步驟和注意事項
    三、雙向電泳實驗結果說明及疑難解析
    四、質譜數據分析說明及疑難解析
    五、結語
  第二節  基因晶元
    一、引言
    二、工作原理
  第三節  基因晶元的製備
    一、概述
    二、探針的選擇和製備
    三、基因晶元基片的選擇和準備
    四、基因晶元的製作
  第四節  基因晶元的檢測
    一、基因晶元的雜交和數據獲取
    二、基因晶元分析常用的軟體和資料庫
  第五節  基因晶元的應用
    一、基因晶元與病原微生物檢測
    二、基因晶元與腫瘤
    三、基因晶元與藥物研發
    四、結語
  參考文獻
第九章  蛋白質-核酸相互作用技術
  第一節  凝膠遷移實驗
    一、引言
    二、實驗設計與基本步驟
    三、實驗舉例與結果說明
    四、需要注意的問題

  第二節  染色質免疫共沉澱技術
    一、引言
    二、實驗基本步驟
    三、實驗舉例
    四、實驗注意事項
  第三節  RNA沉降
    一、實驗基本原理
    二、實驗基本思路
    三、實驗舉例說明
  第四節  RIP實驗
    一、實驗基本原理
    二、實驗思路
    三、注意事項
    四、實驗舉例說明
  參考文獻
第十章  蛋白質-蛋白質相互作用技術
  第一節  運用酵母雙雜交技術篩選與靶蛋白相互作用的蛋白質
    一、引言
    二、實驗儀器及材料
    三、實驗設計流程
    四、實驗方法
    五、實驗結果說明
    六、疑難解析
  第二節  GST沉降
    一、實驗基本原理
    二、實驗基本步驟
    三、實驗舉例
    四、實驗注意事項
  第三節  免疫共沉澱
    一、引言
    二、實驗設計和基本步驟
    三、實驗結果舉例
    四、需要注意的問題
  第四節  細胞共定位
    一、引言
    二、實驗設計和基本步驟
    三、實驗結果舉例說明
    四、實驗注意事項
  參考文獻
第十一章  微生物體內同源重組技術
  第一節  傳統的大腸桿菌體內同源重組方法（RecA重組系統）
    一、引言
    二、利用RecA重組系統構建痢疾桿菌hns基因插入突變體
    三、RecA重組系統構建突變體的其他方法
    四、存在的問題和解決方法
    五、小結
  第二節  Red/ET重組系統
    一、引言
    二、痢疾桿菌hns基因缺失突變體的構建
    三、Red同源重組技術應用策略

    四、應用Gap-Repair克隆技術構建pBR322-Red載體
    五、Red/ET重組系統的其他應用
    六、小結
  參考文獻
第十二章  轉基因動物技術
  第一節  轉基因動物概述
    一、轉基因動物的概念
    二、轉基因動物的分類
    三、轉基因動物的命名
    四、轉基因動物技術的基本原理
    五、轉基因動物的安全性和倫理學問題
    六、轉基因動物技術的發展概況
  第二節  顯微注射法製備轉基因動物
    一、儀器設備及材料和試劑
    二、實驗動物準備
    三、轉基因動物製備方法
    四、影響轉基因動物產生效率的因素
  第三節  利用ES細胞製備轉基因動物
    一、ES細胞的研究歷史
    二、ES細胞的生物學特性
    三、ES細胞分離培養的基本方法
    四、ES細胞的遺傳修飾
    五、轉基因動物製備
  參考文獻
第十三章  基因編輯技術
  第一節  基因打靶技術
    一、基因打靶技術的原理
    二、利用同源重組構建基因打靶動物模型的基本步驟
    三、基因打靶的策略
    四、基因打靶的生物學意義和應用前景
  第二節  CRISPR/Cas9系統
    一、CRISPR/Cas系統的簡介及其作用原理
    二、TypeⅡ CRISPR/Cas9系統
    三、CRISPR/Cas9基因編輯技術的應用舉例
    四、CRISPR/Cas9基因編輯技術的應用前景
  第三節  CRISPR/Cas13系統
    一、CRISPR/Cas13系統的介紹
    二、實驗基本步驟
    三、注意事項
    四、實驗結果說明
    五、疑難解析
  參考文獻
第十四章  流式細胞術實驗方法
    一、引言
    二、實驗方法
    三、實驗結果分析
    四、流式細胞分析的質量控制
  參考文獻
第十五章  幹細胞的分離培養與誘導分化
  第一節  人胎盤來源間充質幹細胞的分離培養與純化

    一、引言
    二、材料、試劑與主要儀器設備
    三、實驗方法
    四、實驗結果
    五、注意事項
  第二節  小鼠間充質幹細胞的分離培養與純化
    一、引言
    二、骨髓法
    三、密質骨法
  第三節  人胚胎幹細胞的培養
    一、引言
    二、實驗材料
    三、實驗方法
    四、注意事項
  第四節  CD34+造血幹細胞與CD14+單核細胞向樹突狀細胞的誘導分化
    一、引言
    二、實驗材料與方法
    三、實驗結果
    四、注意事項
  參考文獻
第十六章  微RNA的構造及實驗技術
  第一節  miRNA克隆
    一、材料與設備
    二、實驗方法
    三、疑難解析
  第二節  miRNA Northern Blot
    一、材料與設備
    二、實驗方法
    三、疑難解析
  第三節  miRNA原位雜交
    一、材料與設備
    二、實驗方法
    三、疑難解析
  第四節  基於poly（A）加尾的miRNA RT-PCR
    一、材料與設備
    二、實驗方法
    三、疑難解析
  第五節  miRNA功能研究
    一、miRNA表達檢測
    二、miRNA功能篩選鑒定
    三、miRNA靶基因鑒定
    四、miRNA非經典功能
  第六節  siRNA的構造及實驗研究
    一、引言
    二、如何進行RNAi實驗
    三、常用RNAi實驗的基本步驟
    四、實驗結果說明
    五、疑難解析
  參考文獻
第十七章  長鏈非編碼RNA研究實驗技術

  第一節  lncRNA克隆
    一、材料與設備
    二、實驗方法
    三、實驗注意事項
  第二節  lncRNA Northern Blot
    一、材料與設備
    二、實驗方法
    三、實驗注意事項
  第三節  lncRNA原位雜交
    一、材料與設備
    二、實驗方法
    三、實驗注意事項
  第四節  lncRNA定量檢測
    一、材料與設備
    二、實驗方法
    三、實驗注意事項
  第五節  lncRNA-蛋白質互作研究技術
    一、RNA pull-down鑒定特定lncRNA結合的蛋白質
    二、RIP鑒定特定蛋白質結合的lncRNA免疫沉澱技術
    三、CLIP鑒定蛋白質與lncRNA的結合位點
    四、ChIRP鑒定與lncRNA結合的蛋白質/DNA
  參考文獻
第十八章  非編碼RNA資料庫及在線分析工具介紹
  第一節  綜合性非編碼RNA資料庫
    一、概論
    二、非編碼RNA相關資料庫
    三、小結
  第二節  miRNA相關資料庫及預測工具
    一、概論
    二、miRNA相關資料庫
    三、miRNA相關預測工具
    四、小結
  第三節  rRNA相關資料庫及預測工具
    一、概述
    二、rRNA相關資料庫
    三、rRNA相關預測工具
    四、小結
  第四節  sRNA相關資料庫及預測工具
    一、概述
    二、sRNA相關資料庫
    三、sRNA靶標相關預測工具
    四、小結
  第五節  siRNA相關資料庫
    一、概述
    二、siRNA相關資料庫
  第六節  tRNA相關資料庫及預測工具
    一、概述
    二、tRNA相關資料庫
    三、tRNA相關預測工具
    四、小結

  第七節  snoRNA相關資料庫及預測工具
    一、概述
    二、snoRNA相關資料庫
    三、snoRNA相關預測工具
    四、小結
  第八節  lncRNA及circRNA相關資料庫
    一、概論
    二、lncRNA及circRNA相關資料庫
    三、小結
  參考文獻

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