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分子生物學經典理論與實用技術

  • 作者：編者:周俊宜|責編:高佳儀
  • 出版社：人民衛生
  • ISBN：9787117358545
  • 出版日期：2024/01/01
  • 裝幀：平裝
  • 頁數：369
人民幣：RMB 65 元      售價：元
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內容大鋼
    本教材以分子生物學理論為指導，圍繞分子生物學研究相關的技術領域，系統介紹基因檢測、基因克隆、基因表達、蛋白質分析技術和分子免疫技術等經典理論和實用技術；緊跟分子生物學技術發展前沿，闡述了基因及表形分析技術、蛋白質結構分析技術、蛋白質功能研究技術、基因編輯技術、組學技術等分子生物學前沿技術體系；貼合教學實際，介紹了分子生物學技術主要儀器使用指南和實用資料庫，創造性地編寫了實驗教學版的標準化操作規程。內容全面詳盡，既包括簡明扼要的綱領性技術原理，又覆蓋了分子生物學領域常見和實用的技術方法和實驗方案，且有針對性的技術問題討論和解決問題的策略。
作者介紹
編者:周俊宜|責編:高佳儀
目錄
內容總覽
總論
      一、分子生物學技術
      二、分子醫學的內容
      三、分子醫學的社會、倫理問題
      四、分子醫學在現代醫學發展中的意義
第一篇  核酸實驗技術
  第一章  核酸的製備
    第一節  基因組DNA的提取與純化
      一、基因組DNA提取的基本過程
      二、基因組DNA提取的基本策略
      三、苯酚-氯仿抽提法提取基因組DNA的實驗方案
      四、Chelex-100法提取基因組DNA的實驗方案
    第二節  RNA的提取和cDNA合成
      一、RNA提取和cDNA合成的基本概念
      二、RNA提取的基本策略
      三、cDNA合成的基本策略
      四、RNA提取和cDNA合成的實驗方案
  第二章  聚合?鏈反應
    第一節  聚合?鏈反應的基本原理
      一、PCR的基本概念
      二、PCR技術的基本原理
    第二節  常用PCR技術的實驗策略
      一、PCR技術的主要類型
      二、基礎PCR技術的實驗方案
      三、RT-PCR技術的實驗策略
      四、PCR實驗的影響因素及討論
      五、PCR常見問題及異常結果的分析
    第三節  實時熒光定量PCR
      一、實時熒光定量PCR技術的基本概念
      二、實時熒光定量PCR技術的基本原理和策略
      三、實時熒光定量PCR技術的實驗方案
  第三章  核酸的檢測
    第一節  DNA的凝膠電泳檢測
      一、電泳的基本概念
      二、瓊脂糖凝膠電泳的原理和基本策略
      三、聚丙烯?胺凝膠電泳檢測DNA
    第二節  分光光度分析法
      一、分光光度分析法的原理
      二、分光光度法檢測DNA含量
      三、分光光度法檢測RNA濃度
  第四章  核酸雜交與核酸探針
    第一節  核酸雜交與核酸探針的基本原理
      一、核酸雜交與核酸探針的基本概念
      二、常用的核酸雜交方法
      三、核酸探針的種類
      四、核酸探針的標記物
    第二節  核酸探針的合成與標記
      一、雙鏈DNA探針
      二、單鏈DNA探針

      三、RNA探針
    第三節  雜交常規實驗
      一、原位雜交法進行重組質粒的篩選
      二、Southern雜交
      三、Northern雜交
  第五章  基因克隆
    第一節  目的基因的獲取和基因載體的製備
      一、目的基因獲取的基本策略
      二、基因載體的基本概念
      三、質粒載體的製備
    第二節  切割目的基因和基因載體
      一、限制性內切?的基本概念
      二、?切反應的體系和基本策略
      三、?切反應的實驗方案
    第三節  目的基因和載體的體外連接
      一、目的基因和載體重組的基本策略
      二、目的基因和載體連接的工具?
      三、目的基因和載體連接的實驗方案
      四、注意事項及常見問題分析
    第四節  重組DNA轉化宿主細胞
      一、轉化的基本概念
      二、轉化實驗的基本策略
      三、原核細胞轉化的實驗方案
      四、真核細胞轉染的實驗方案
    第五節  重組體陽性克隆的篩選
      一、陽性克隆篩選的基本策略
      二、重組質粒轉化大腸埃希菌及藍白篩選的實驗方案
      三、真核轉染細胞篩選的實驗方案
    第六節  外源基因在宿主細胞中的表達
      一、概論
      二、宿主細胞
      三、表達載體
      四、提高目的基因表達水平的基本策略
      五、表達產物檢測的基本策略
      六、表達蛋白質的分離純化
      七、基因表達的實驗方案
第二篇  蛋白質實驗技術
  第六章  蛋白質樣品的製備
    第一節  樣品的處理
      一、原材料的選擇和預處理
      二、細胞破碎的實驗策略
    第二節  蛋白質的提取和純化
      一、蛋白質提取的實驗策略
      二、蛋白質分離純化的實驗策略
      三、蛋白質濃縮、乾燥和保存的實驗策略
  第七章  蛋白質定量檢測技術
    第一節  紫外吸收測定法
    第二節  Folin-酚試劑法
    第三節  考馬斯亮藍法
    第四節  二??甲酸檢測法

  第八章  蛋白質的SDS-聚丙烯?胺凝膠電泳
    第一節  SDS-PAGE的原理和基本策略
      一、聚丙烯?胺凝膠的製備
      二、SDS-PAGE分離蛋白質
    第二節  SDS-PAGE分離蛋白質的實驗方案
      一、SDS-PAGE的實驗方案
      二、用考馬斯亮藍對SDS-聚丙烯?胺凝膠進行染色的實驗方案
      三、用銀鹽對SDS-聚丙烯?胺凝膠進行染色的實驗方案
      四、SDS-聚丙烯?胺凝膠的乾燥
      五、注意事項及常見問題分析
  第九章  蛋白質的免疫印跡技術
    第一節  免疫印跡技術的基本原理
    第二節  免疫印跡技術的基本策略
      一、蛋白質的SDS-PAGE
      二、蛋白質從凝膠轉移至膜
      三、印跡膜的蛋白染色
      四、印跡膜的免疫檢測
      五、免疫印跡后膜的重複使用
      六、注意事項及常見問題分析
  第十章  蛋白質層析技術
    第一節  層析的基本理論和基本操作
      一、層析的基本概念
      二、塔板理論
      三、層析法的分類
      四、柱層析的基本裝置及基本操作
    第二節  凝膠層析
      一、凝膠層析的基本原理
      二、葡聚糖凝膠層析
      三、凝膠層析的應用
      四、葡聚糖凝膠層析純化血清γ-球蛋白的實驗方案
    第三節  離子交換層析
      一、離子交換層析的基本原理
      二、離子交換層析的基本操作
      三、離子交換層析的應用
      四、離子交換層析法分離血清蛋白質的實驗方案
    第四節  親和層析
      一、親和層析的基本原理
      二、親和層析的載體
      三、親和層析的間隔臂分子
      四、親和層析的配體
      五、親和層析的基本操作及注意事項
    第五節  高效液相色譜法
      一、高效液相色譜法的基本原理
      二、高效液相色譜的固定相和流動相
      三、高效液相色譜的類型與應用
第三篇  免疫實驗技術
  第十一章  淋巴細胞分離與E玫瑰花環形成試驗
  第十二章  免疫血清製備
  第十三章  血型鑒定
  第十四章  ?聯免疫吸附試驗

  第十五章  免疫印跡
  第十六章  ?聯免疫斑點法檢測結核特異性T細胞γ干擾素釋放
  第十七章  間接免疫熒光技術檢測抗核抗體
  第十八章  T淋巴細胞轉化試驗
  第十九章  T淋巴細胞亞群及胞內γ干擾素的流式細胞檢測
第四篇  分子生物學實驗技術
  第二十章  口腔黏膜細胞基因組DNA的製備
  第二十一章  PCR檢測人ApoBVNTR等位基因多態性
  第二十二章  單鏈構象多態性分析法檢測人HLA等位基因多態性
  第二十三章  SDS鹼裂解法提取質粒DNA
  第二十四章  重組質粒的?切鑒定及紫外分光光度法檢測DNA含量
  第二十五章  重組DNA的轉化與篩選
  第二十六章  圓盤電泳
  第二十七章  蛋白質的離子交換層析、紫外分光光度法檢測蛋白質含量
  第二十八章  葡聚糖凝膠層析實驗
第五篇  分子生物學前沿技術
  第二十九章  DNA及RNA序列分析技術
    第一節  DNA序列分析技術
      一、第二代測序技術
      二、第三代測序技術
      三、單細胞全基因組測序技術
      四、甲基化修飾的檢測技術
    第二節  RNA序列分析技術
      一、以第二代測序技術為核心的RNA測序
      二、RNA分子直接測序
      三、基因表達常用資料庫
  第三十章  蛋白質結構分析技術
    第一節  蛋白質分離純化技術
      一、蛋白質的分離方法
      二、活性測試
    第二節  蛋白質譜分析技術
      一、蛋白質譜技術
      二、利用蛋白質譜可獲得的結構信息
    第三節  蛋白質空間結構分析技術
      一、晶體獲得
      二、結構解析技術
    第四節  蛋白質的生物信息學分析工具和資料庫介紹
      一、蛋白質結構資料庫
      二、UniProt
      三、蛋白質結構可視化和分析軟體
  第三十一章  蛋白質功能研究技術
    第一節  蛋白質與蛋白質互作分析技術
      一、免疫共沉澱技術
      二、酵母雙雜交技術
      三、免疫熒光技術
    第二節  蛋白質與小分子互作分析技術
      一、熒光偏振免疫分析法
      二、等溫量熱滴定儀
      三、微量熱泳動技術
    第三節  蛋白質與核酸分子互作分析技術

      一、電泳遷移率變動分析
      二、染色質免疫共沉澱
    第四節  蛋白質組學
      一、蛋白質組學研究內容
      二、蛋白質組學常用技術
  第三十二章  基因編輯技術
    第一節  鋅指核酸?技術
      一、鋅指核酸?的結構和作用機制
      二、鋅指核酸?技術的發展和應用
      三、鋅指核酸?技術的優勢與不足
    第二節  轉錄激活因子效應物核酸?技術
      一、TALEN技術
      二、TALEN技術的發展和應用
      三、TALEN技術的優勢與不足
    第三節  規律間隔成簇短迴文重複序列
      一、CRISPR/Cas系統
      二、CRISPR/Cas系統的結構和機制
      三、CRISPR/Cas系統廣泛應用於基因編輯
    第四節  RNA干擾
      一、RNA干擾現象
      二、RNA干擾的機制
      三、RNA干擾的應用
  第三十三章  代謝組學的技術與應用
    第一節  代謝組學技術
      一、核磁共振技術
      二、色譜-質譜聯用技術
    第二節  代謝組學的應用
      一、新生兒遺傳代謝病篩查
      二、新型生物標誌物的開發
      三、腫瘤早期診斷和治療
      四、藥物療效及毒性評價
      五、其他
第六篇  分子生物學技術資料庫
  第三十四章  分子生物學實驗室的基本要求
      一、實驗室的常規儀器及設施
      二、離心機室
      三、分析儀器室
      四、核素實驗室
      五、細胞培養室
      六、暗室
      七、冷室
  第三十五章  分子生物學常用儀器
    第一節  離心機
      一、離心機的基本原理和結構
      二、離心方法與離心機的使用
      三、離心機的發展與新功能的應用
    第二節  分光光度計、?標儀及超微量分光光度計
      一、分光光度計的基本原理和組成
      二、分光光度法的應用及引起誤差的因素
      三、?標儀

      四、超微量生物檢測儀
      五、分光光度計、超微量生物檢測儀的發展和應用展望
    第三節  高效液相色譜儀
      一、高效液相色譜儀的基本結構和原理
      二、高效液相色譜儀的操作方法與應用
      三、高效液相色譜的發展和應用展望
    第四節  自動化電泳儀器
      一、電泳儀器的基本結構和工作原理
      二、常用的電泳方法與操作
      三、電泳儀器的發展和應用展望
    第五節  PCR基因擴增儀
      一、PCR基因擴增儀的基本原理和結構
      二、PCR基因擴增儀的發展和應用展望
    第六節  全自動DNA序列測定儀和全自動核酸提取儀
      一、DNA序列測定儀器的基本原理和結構
      二、全自動核酸提取儀
    第七節  生物分子圖像分析系統
      一、生物分子圖像分析系統的基本結構和原理
      二、生物分子圖像分析系統的發展和應用展望
    第八節  生物晶元相關儀器
      一、生物晶元相關儀器介紹
      二、生物晶元的發展和應用展望
    第九節  生物質譜儀
      一、生物質譜儀的基本原理和結構
      二、生物質譜儀的發展和應用展望
    第十節  流式細胞儀
      一、流式細胞儀的基本結構和工作原理
      二、流式細胞儀的操作方法與注意事項
      三、流式細胞儀的發展和應用展望
    第十一節  細胞成像系統
      一、細胞成像系統的基本結構和原理
      二、細胞成像系統的功能特點及使用
      三、細胞成像系統的發展和應用展望
附錄  分子生物學技術常用數據表
  附錄一  分子質量標準參照
  附錄二  遺傳密碼表
  附錄三  各種pH值的Tris緩衝液的配製
  附錄四  染料在非變性聚丙烯?胺凝膠中的遷移速度
  附錄五  染料在變性聚丙烯?胺凝膠中的遷移速度
  附錄六  瓊脂糖凝膠濃度與線性DNA分辨範圍
  附錄七  溫度對50mmol/LTris-HCl液pH值的影響
  附錄八  常見的市售酸鹼的濃度
  附錄九  分子克隆常見緩衝液
  附錄十  磷酸緩衝液
  附錄十一  常見的電泳緩衝液
  附錄十二  凝膠加樣緩衝液
  附錄十三  常見溶液的配製

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