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基因工程(精)

  • 作者:編者:王旭初|責編:陳新//李迪//劉晶
  • 出版社:科學
  • ISBN:9787030771780
  • 出版日期:2024/02/01
  • 裝幀:精裝
  • 頁數:551
人民幣:RMB 398 元      售價:
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內容大鋼
    本書共19章,從原理、技術和應用三個方面對基因工程進行了較為系統的闡述。首先,簡要介紹了基因和基因表達調控原理,展示了基因組、轉錄組、蛋白質組等組學的最新進展。隨後,系統闡述了基因工程操作中基因工具?的使用、目的基因分離、載體構建、外源基因導入、陽性轉化子篩選等技術方法,並概述了核酸雜交、基因晶元、基因編輯、基因沉默、轉座子突變和幹細胞轉化等基因工程新技術。在此基礎上,本書重點介紹了基因工程技術在原核細胞、酵母、植物、動物以及人類基因治療工程中的應用進展,詳細論述了分子抗體工程、基因編輯、合成生物學等基因工程新技術和新產業。最後,討論了基因工程中可能存在的生物安全問題,並提出了相應的監管措施,展望了應用前景。
    本書內容全面、系統權威、圖文並茂,具有較強的學術性和新穎性,可供生物工程、生物技術、生物科學、分子生物學、細胞生物學、生物化學等相關專業的高校教師、科研人員、研究生及高年級本科生閱讀參考。

作者介紹
編者:王旭初|責編:陳新//李迪//劉晶

目錄
第1章  基因工程概論
  1.1  基因工程概述
    1.1.1  基因和基因組
    1.1.2  基因工程簡介
  1.2  基因工程基本技術體系
    1.2.1  基因工程技術體系構成
    1.2.2  基因工程基本操作流程
  1.3  基因工程發展簡史
    1.3.1  基因工程誕生背景
    1.3.2  基因工程誕生標誌
    1.3.3  基因工程發展過程
    1.3.4  基因工程最新進展
  1.4  基因工程主要研究內容
    1.4.1  基因克隆
    1.4.2  基因工程工具?
    1.4.3  基因工程載體
    1.4.4  外源基因導入宿主細胞
    1.4.5  轉化子的鑒定篩選
    1.4.6  基因工程產品的分離純化及產業化應用
  1.5  基因工程的應用
    1.5.1  基因工程在后基因組時代的作用
    1.5.2  基因工程在工業中的應用
    1.5.3  基因工程在農業生產中的應用
    1.5.4  基因工程在醫藥健康產業中的應用
    1.5.5  基因工程應用前景展望
  本章小結
第2章  基因表達調控
  2.1  基因調控基本特徵
    2.1.1  基因表達
    2.1.2  基因表達的時空特性
    2.1.3  基因表達的方式
    2.1.4  基因表達調控的基本原理
    2.1.5  基因表達調控的生物學意義
  2.2  原核基因表達調控
    2.2.1  原核生物基因的轉錄機制
    2.2.2  原核基因轉錄調節特點
    2.2.3  乳糖操縱子調節機制
    2.2.4  色氨酸操縱子調節機制
    2.2.5  半乳糖操縱子調節機制
    2.2.6  阿拉伯糖操縱子調節機制
    2.2.7  原核生物的翻譯水平調控
  2.3  真核基因表達調控
    2.3.1  真核生物的基因結構與轉錄前調控
    2.3.2  真核基因的轉錄調控
    2.3.3  真核基因的轉錄后調控
  2.4  調控真核基因表達的主要研究技術
    2.4.1  凝膠遷移實驗
    2.4.2  染色質免疫共沉澱技術
    2.4.3  DNaseⅠ足跡實驗
    2.4.4  酵母單雜交系統

    2.4.5  雙螢光素?報告系統
  2.5  轉基因植物中外源基因的表達調控
    2.5.1  轉化外源基因的瞬時表達和穩定表達
    2.5.2  轉錄調控序列對外源基因表達的影響
    2.5.3  外源基因在翻譯水平上的調控
    2.5.4  外源DNA整合的遺傳效應對基因表達的影響
  本章小結
第3章  基因組研究
  3.1  基因組及其類型和大小
    3.1.1  原核生物基因組
    3.1.2  真核生物細胞核基因組
    3.1.3  真核生物細胞器基因組
  3.2  遺傳圖譜
  3.3  物理圖譜
    3.3.1  作圖文庫
    3.3.2  物理圖譜的構建
    3.3.3  物理圖譜和遺傳圖譜比較
  3.4  基因組測序
    3.4.1  DNA測序的方法
    3.4.2  基因組測序
    3.4.3  序列組裝
  3.5  基因組序列分析
    3.5.1  搜尋基因
    3.5.2  基因功能預測
  3.6  基因組序列特徵
    3.6.1  基因組序列複雜性
    3.6.2  原核生物基因組序列
    3.6.3  真核生物基因組序列
    3.6.4  重複DNA
  本章小結
第4章  多組學與生物信息學
  4.1  轉錄組學
    4.1.1  轉錄組學概述
    4.1.2  轉錄組研究方法
    4.1.3  非編碼RNA
    4.1.4  RNA測序技術的應用
  4.2  蛋白質組學
    4.2.1  蛋白質組學概述
    4.2.2  基於凝膠的差異蛋白分離技術
    4.2.3  質譜鑒定蛋白質技術
    4.2.4  基於質譜的定量蛋白質組學研究
    4.2.5  蛋白質翻譯后修飾
    4.2.6  功能蛋白質組學研究
    4.2.7  蛋白質組研究應用
  4.3  代謝組學
    4.3.1  代謝組學概述
    4.3.2  代謝組學研究技術
    4.3.3  代謝組學的應用
  4.4  表型組學
    4.4.1  表型組學概述

    4.4.2  表型組學研究技術
    4.4.3  表型組學的應用
  4.5  生物信息學
    4.5.1  生物信息學概述
    4.5.2  生物信息學研究內容
    4.5.3  生物信息資料庫
    4.5.4  分子進化分析
  4.6  多組學整合研究
    4.6.1  多組學整合概述
    4.6.2  多組學整合研究思路
    4.6.3  多組學數據整合分析的應用及展望
  本章小結
第5章  基因工程工具?
  5.1  限制性內切核酸?
    5.1.1  限制性內切核酸?的發現和分類
    5.1.2  Ⅱ類限制性內切核酸?的特點
    5.1.3  限制性內切核酸?的命名法
    5.1.4  限制性內切核酸?的反應條件
    5.1.5  影響限制性內切核酸??切的反應條件
  5.2  連接?
    5.2.1  連接?的發現
    5.2.2  連接?的種類
    5.2.3  不同末端的連接策略
    5.2.4  DNA連接?的影響因素
  5.3  DNA聚合?
    5.3.1  DNA聚合?的發現
    5.3.2  DNA聚合?的功能
  5.4  核酸修飾?
    5.4.1  末端脫氧核?酸轉移?
    5.4.2  鹼性磷酸?
    5.4.3  T4噬菌體多核?酸激?
  5.5  核酸?和外切核酸?
    5.5.1  核糖核酸?
    5.5.2  脫氧核糖核酸?Ⅰ
    5.5.3  S1核酸?
    5.5.4  外切核酸?
  本章小結
第6章  目的基因分離
  6.1  化學合成DNA分離目的基因
  6.2  基因的電子克隆
  6.3  基因文庫獲取目的基因
    6.3.1  構建基因文庫法分離目的基因
    6.3.2  cDNA基因文庫的構建和篩選
    6.3.3  PCR技術的基本原理
    6.3.4  影響PCR反應的因素
    6.3.5  反向PCR
    6.3.6  反轉錄PCR
    6.3.7  熒光定量PCR
RACE-PCR
6

    6.3.9  多重PCR
    6.3.10  原位PCR
    6.3.11  重組PCR
    6.3.12  不對稱PCR
  6.4  目的基因分離技術
    6.4.1  利用DNA晶元分析目的基因
    6.4.2  利用cDNA微陣列分離目的基因
    6.4.3  轉座子誘變分離克隆目的基因
    6.4.4  T-DNA標籤法分離目的基因
    6.4.5  圖位克隆法分離目的基因
  本章小結
第7章  基因工程載體
  7.1  基因克隆載體
    7.1.1  質粒載體
    7.1.2  噬菌體載體
    7.1.3  黏粒載體
    7.1.4  人工染色體載體
  7.2  基因表達載體
    7.2.1  大腸桿菌原核表達載體
    7.2.2  酵母與動物細胞真核表達載體
    7.2.3  植物細胞真核表達載體
  本章小結
第8章  重組DNA分子導入受體細胞
  8.1  重組DNA分子導入原核受體細胞
    8.1.1  自然條件下細菌受體細胞的轉化過程
    8.1.2  感受態細胞的選擇
    8.1.3  重組DNA分子導入大腸桿菌細胞的方法
    8.1.4  聚乙二醇介導的細菌原生質體轉化
  8.2  重組DNA分子導入酵母細胞
    8.2.1  聚乙二醇介導的酵母細胞轉化
    8.2.2  電轉化法介導的酵母細胞轉化
    8.2.3  鹼性陽離子Li+介導的酵母細胞轉化
  8.3  外源重組基因導入植物細胞
    8.3.1  DNA直接轉化法
    8.3.2  農桿菌Ti質粒轉化法
  8.4  動物細胞遺傳轉化的方法
    8.4.1  動物細胞的物理轉染法
    8.4.2  動物細胞的化學轉染法
    8.4.3  動物細胞的生物轉染法
  本章小結
第9章  轉化子篩選與鑒定
  9.1  遺傳學檢測方法
    9.1.1  基於載體基因的篩選與鑒定
    9.1.2  互補選擇法
    9.1.3  基於目的基因的篩選與鑒定
  9.2  電泳檢測法
    9.2.1  直接電泳檢測法
    9.2.2  ?切電泳檢測法
    9.2.3  PCR擴增檢測法
  9.3  核酸分子雜交檢測法

    9.3.1  探針的製備
    9.3.2  Southern印跡雜交
    9.3.3  Northern印跡雜交
    9.3.4  菌落印跡原位雜交
    9.3.5  斑點印跡雜交
  9.4  免疫化學檢測法
    9.4.1  放射性抗體檢測法
    9.4.2  免疫沉澱測定法
    9.4.3  ?聯免疫吸附測定法
  9.5  轉譯篩選法
    9.5.1  雜交抑制轉譯檢測法
    9.5.2  雜交選擇轉譯檢測法
  本章小結
第10章  基因工程新技術
  10.1  核酸分子雜交技術
    10.1.1  核酸雜交的基本原理
    10.1.2  核酸探針的製備
    10.1.3  核酸雜交種類與方法
    10.1.4  核酸雜交技術的應用
  10.2  晶元技術
    10.2.1  基因晶元的基本原理
    10.2.2  基因晶元的種類
    10.2.3  基因晶元製作技術的基本步驟
    10.2.4  基因晶元技術的應用
  10.3  基因敲除技術
    10.3.1  Cre-loxP基因敲除系統
    10.3.2  FLP/FRT系統
    10.3.3  噬菌體phiC31位點重組?系統
    10.3.4  ZFN技術
    10.3.5  TALEN技術
    10.3.6  CRISPR/Cas9技術
    10.3.7  基因敲除技術的應用
  10.4  基因沉默技術
    10.4.1  RNA干擾技術
    10.4.2  表觀遺傳基因組編輯技術
    10.4.3  基因沉默技術的應用
  10.5  轉座子突變技術
    10.5.1  轉座子基因突變系統
    10.5.2  轉座子突變技術的應用
  10.6  植物遺傳轉化新方法
    10.6.1  碳納米管技術
    10.6.2  DNA納米結構轉化技術
    10.6.3  幹細胞轉化技術
    10.6.4  質體轉化
    10.6.5  磁性納米顆粒
  本章小結
第11章  原核細胞基因工程
  11.1  原核細胞基因表達特徵
  11.2  原核細胞基因工程概述
    11.2.1  原核細胞基因工程簡介

    11.2.2  原核細胞基因調控規律
    11.2.3  原核細胞基因表達主要調控元件
  11.3  原核細胞基因表達系統的種類及特點
    11.3.1  原核細胞基因工程表達系統的主要種類
    11.3.2  大腸桿菌表達系統的特點及應用
    11.3.3  芽孢桿菌表達系統的特點及應用
    11.3.4  棒狀桿菌表達系統的特點及應用
    11.3.5  鏈黴菌表達系統的特點及應用
    11.3.6  藍藻表達系統及應用
    11.3.7  乳酸菌表達系統及應用
  11.4  原核細胞基因表達步驟和主要策略
    11.4.1  原核細胞基因工程表達主要步驟
    11.4.2  原核細胞基因工程中外源蛋白表達主要特點
    11.4.3  提高外源基因在原核細胞中表達效率的主要方法
    11.4.4  優化原核表達載體質粒的主要方法
    11.4.5  選擇不同偏好密碼子提高原核表達效率
  11.5  原核細胞基因工程表達產物分離純化
    11.5.1  原核細胞基因工程表達產物分離純化特點
    11.5.2  原核細胞基因工程表達產物分離純化策略
    11.5.3  原核細胞基因工程表達產物純化流程
    11.5.4  包涵體蛋白分離和重組蛋白復性
    11.5.5  分泌型表達蛋白的純化和濃縮
  11.6  原核細胞基因工程菌大規模培養及發酵
    11.6.1  原核細胞基因工程菌發酵特點
    11.6.2  原核細胞基因工程菌的深層培養
    11.6.3  原核細胞基因工程菌的大規模發酵
  11.7  原核細胞基因工程菌遺傳不穩定性及相應對策
    11.7.1  基因工程菌遺傳不穩定性原因
    11.7.2  改善基因工程菌不穩定性的方法
    11.7.3  優化培養條件提高基因工程菌產量和穩定性
    11.7.4  固定化培養可明顯提高基因工程菌產量和質粒穩定性
  11.8  原核細胞基因工程應用實例
    11.8.1  利用大腸桿菌生產人胰島素
    11.8.2  利用大腸桿菌生產重組人生長激素
    11.8.3  利用大腸桿菌生產重組人抗體及其片段
  本章小結
第12章  酵母基因工程
  12.1  酵母基因工程表達體系
    12.1.1  酵母基因表達宿主系統
    12.1.2  酵母表達載體
    12.1.3  轉化方法
  12.2  常見酵母表達系統
    12.2.1  釀酒酵母表達系統
    12.2.2  畢赤酵母表達系統
    12.2.3  解脂耶氏酵母表達系統
    12.2.4  圓紅冬孢酵母表達系統
    12.2.5  乳酸克魯維酵母表達系統
  12.3  影響外源基因在酵母中表達的主要因素
    12.3.1  轉錄水平控制
    12.3.2  翻譯水平控制

    12.3.3  表達載體的拷貝數與穩定性
    12.3.4  其他因素
  12.4  酵母基因工程應用舉例
    12.4.1  利用工程酵母菌生產功能性脂質
    12.4.2  利用工程酵母菌生產疫苗
    12.4.3  利用工程酵母菌生產?類化合物
  本章小結
第13章  植物基因工程
  13.1  植物基因工程載體分類及構建
    13.1.1  植物基因工程載體分類
    13.1.2  Ti質粒載體及其構建
    13.1.3  Ri質粒載體及其構建
    13.1.4  植物表達載體的基因表達盒
  13.2  植物基因工程受體系統
    13.2.1  植物原生質體受體系統
    13.2.2  植物愈傷組織受體系統
    13.2.3  生殖細胞受體系統
    13.2.4  葉綠體轉化系統
  13.3  植物遺傳轉化方法
    13.3.1  農桿菌介導的植物基因遺傳轉化
    13.3.2  植物細胞的物理直接導入法
    13.3.3  植物細胞的化學直接導入法
    13.3.4  花粉管通道法
  13.4  轉基因植物篩選與靶標基因檢測
    13.4.1  生物學特性鑒定
    13.4.2  標記基因的表達檢測
    13.4.3  外源基因及其表達產物的分子鑒定
  13.5  高等植物基因表達系統
    13.5.1  外源基因的四環素誘導系統
    13.5.2  外源基因的乙醇誘導系統
    13.5.3  外源基因的類固醇誘導系統
    13.5.4  外源基因的地塞米松誘導系統和四環素抑制系統
  13.6  利用轉基因技術研究植物基因表達調控
    13.6.1  利用報告基因研究啟動子和終止子功能
    13.6.2  利用T-DNA或轉座子元件克隆植物基因
    13.6.3  利用病毒誘導型基因沉默機制鑒定植物功能基因
    13.6.4  利用增強子或啟動子元件原位激活鑒定植物功能基因
  13.7  利用轉基因技術在植物中生產重組外源蛋白
    13.7.1  利用植物生物反應器生產醫用蛋白
    13.7.2  利用植物生物反應器生產食品或飼料添加劑
    13.7.3  利用植物生物反應器生產工業原料
    13.7.4  利用植物生物反應器生產藥用次生代謝物
  13.8  利用轉基因技術改良植物品質
    13.8.1  抗病蟲害植物基因工程
    13.8.2  抗除草劑植物基因工程
    13.8.3  抗逆境植物基因工程
    13.8.4  改變花型花色的植物基因工程
    13.8.5  控制果實成熟的植物基因工程
    13.8.6  提高農作物產量和品質的植物基因工程
  本章小結

第14章  動物基因工程
  14.1  動物體細胞核移植技術
    14.1.1  動物克隆研究發展史
    14.1.2  體細胞核移植技術的原理
    14.1.3  體細胞核移植技術的應用
  14.2  動物基因打靶技術
    14.2.1  動物基因打靶技術簡介
    14.2.2  動物基因打靶技術原理
    14.2.3  基因打靶載體設計
    14.2.4  動物基因打靶技術的應用
  14.3  轉基因動物
    14.3.1  轉基因動物研究概述
    14.3.2  轉基因動物製備技術
    14.3.3  轉基因動物的應用
  14.4  基因工程疫苗
    14.4.1  基因工程疫苗的分類
    14.4.2  家畜家禽基因工程疫苗
  本章小結
第15章  基因治療工程
  15.1  基因治療概論
    15.1.1  基因治療的產生及發展
    15.1.2  基因治療的策略
    15.1.3  基因治療一般原則
  15.2  基因治療的載體
    15.2.1  病毒載體
    15.2.2  非病毒載體
  15.3  基因編輯技術
    15.3.1  歸巢內切?技術
    15.3.2  鋅指核酸?技術
    15.3.3  轉錄激活因子樣效應物核酸?技術
    15.3.4  規律成簇的短迴文重複序列技術
  15.4  重要疾病的基因治療
    15.4.1  腫瘤的基因治療
    15.4.2  病毒病的基因治療
    15.4.3  罕見病的基因治療
  本章小結
第16章  分子抗體工程
  16.1  納米抗體
    16.1.1  駝源納米抗體
    16.1.2  鯊魚納米抗體
  16.2  分子抗體工程
    16.2.1  單克隆抗體ScFv片段基因克隆與表達
    16.2.2  駝源納米抗體製備與應用
    16.2.3  鯊魚納米抗體製備
  16.3  抗體人源化基因工程
    16.3.1  小鼠單克隆抗體人源化
    16.3.2  駝源納米抗體人源化
    16.3.3  全人源單克隆抗體
  本章小結
第17章  基因編輯

  17.1  基因編輯技術誕生過程
  17.2  基因編輯的概念和原理
    17.2.1  基因編輯的概念
    17.2.2  基因編輯基本原理
  17.3  基因編輯發展史
    17.3.1  第一代基因編輯系統鋅指核酸?的發現與應用
    17.3.2  第二代基因編輯系統的發現與應用
    17.3.3  第三代基因編輯系統的發現與發展
  17.4  基因編輯的現實意義和應用潛力
    17.4.1  基因編輯的現實意義與發展潛力
    17.4.2  基因編輯在植物品種遺傳改良上的應用
    17.4.3  基因編輯在動物育種上的應用
    17.4.4  基因編輯在臨床治療上的應用
    17.4.5  基因編輯在微生物改造上的應用
  17.5  基因編輯技術存在的問題及發展前景展望
    17.5.1  基因編輯技術的局限與潛在風險
    17.5.2  道德倫理與生物安全問題
    17.5.3  基因編輯技術的改良與發展方向
  本章小結
第18章  合成生物學
  18.1  合成生物學概述
    18.1.1  合成生物學誕生過程
    18.1.2  合成生物學研究內容
    18.1.3  合成生物學發展趨勢
  18.2  合成生物系統的基因線路
    18.2.1  基因線路概述
    18.2.2  調控元件
    18.2.3  開關基因線路
    18.2.4  邏輯門基因線路
    18.2.5  基因線路實例
  18.3  合成生物系統的設計、組裝與優化
    18.3.1  合成生物系統的設計
    18.3.2  合成生物系統組裝與構建
    18.3.3  合成生物系統的優化與篩選
    18.3.4  「設計—構建—檢驗—重設計」循環
    18.3.5  合成生物系統的設計、組裝與優化實例
  18.4  無細胞蛋白質合成體系
    18.4.1  無細胞蛋白質合成體系的類型
    18.4.2  無細胞蛋白質合成體系的優化改造
    18.4.3  無細胞蛋白質合成體系的應用
  18.5  合成生物學的具體應用
    18.5.1  合成生物學的「建物致知」
    18.5.2  合成生物學的「建物致用」
  本章小結
第19章  基因工程生物安全與監管
  19.1  實驗室安全管理的概念
  19.2  基因工程產品的安全管理
    19.2.1  基因工程植物安全管理
    19.2.2  基因工程動物生物安全管理
    19.2.3  基因工程微生物安全管理

  19.3  基因工程產品的倫理問題
    19.3.1  動物試驗倫理
    19.3.2  人體試驗倫理
    19.3.3  生命倫理的基本原則
  19.4  基因工程生物安全性評價及控制措施
    19.4.1  基因工程生物安全性評價目的
    19.4.2  基因工程生物安全性評價的主要內容
    19.4.3  我國基因工程生物安全性評價審批流程
    19.4.4  基因工程生物安全控制措施
  19.5  基因工程生物安全監管體系
    19.5.1  我國基因工程安全監管體系
    19.5.2  國外基因工程安全監管體系
    19.5.3  我國生物安全管理原則
    19.5.4  我國基因工程安全監管法律法規
    19.5.5  國外基因工程安全監管法律法規
    19.5.6  我國基因工程監管現狀
  本章小結
參考文獻

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