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17α-甲基睾酮對稀有?鯽的影響

  • 作者：劉少貞|責編:李冠橋
  • 出版社：中國農業科技
  • ISBN：9787511665546
  • 出版日期：2023/12/01
  • 裝幀：平裝
  • 頁數：176
人民幣：RMB 80 元      售價：元
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內容大鋼
    環境內分泌干擾物（EDCs）不僅影響野生動物的健康，更重要的是危害到了人類的健康。很大一部分環境內分泌干擾物最終都進入到了水環境中，對水生生物的生殖、內分泌等系統造成損傷。本書採用組織學方法觀察了稀有鮈鯽成魚暴露BPA、MT和EE2后精巢和卵巢的發育情況。研究結果顯示，EE2和MT暴露稀有鮈鯽7、14和21天後均對精巢和卵巢的發育產生了顯著的抑製作用，嚴重阻礙了精子和卵母細胞的成熟，而BPA暴露稀有鮈鯽7天的時候未發現其對精巢和卵巢造成可見的組織學影響。
作者介紹
劉少貞|責編:李冠橋
    劉少貞，1983年1月生，陝西西安人，博士，副教授，碩士生導師，山西省「三晉英才」青年優秀人才，山西農業大學「晉農新秀」，科學傳播專家，山西省現代農業產業技術體系漁產業技術體系崗位專家。主要從事水產養殖及水域生態學研究。主持國家自然基金1項，山西省自然基金2項，山西省「三區」人才項目4項，校企合作等項目共10余項。發表高水平論文10余篇，起草地方標準1項，獲得發明專利1項、實用新型專利3項，參編「十四五」規劃教材1部。
目錄
1  相關研究進展
  1.1  環境內分泌干擾物
    1.1.1  EDCs的作用機制
    1.1.2  環境內分泌干擾物的危害
    1.1.3  17α-甲基睾酮（MT）和乙炔雌二醇（EE2）概述
  1.2  EDCs對水生生物性腺及類固醇激素的影響
  1.3  類固醇激素合成相關?類及其基因
  1.4  EDCs對水生生物性腺及脂質代謝的影響
  1.5  ?聯免疫吸附測定法
    1.5.1  雙抗體夾心法
    1.5.2  雙抗原夾心法
    1.5.3  間接法測抗體
    1.5.4  競爭法測抗體
    1.5.5  競爭法測抗原
    1.5.6  捕獲包被法
    1.5.7  ABS-ELISA
  1.6  數字基因表達譜測序
    1.6.1  數字基因表達譜測序原理
    1.6.2  數字基因表達譜測序優點
    1.6.3  數字基因表達譜測序步驟
  1.7  水環境中毒性試驗材料
    1.7.1  稀有鮈鯽（Gobiocypris rarus）生活習性與分佈
    1.7.2  稀有鮈鯽作為毒性試驗材料具有的優點
  1.8  研究的目的與意義
2  類固醇激素合成相關基因的克隆、序列分析及其表達
  2.1  實驗材料
    2.1.1  稀有鮈鯽
    2.1.2  實驗試劑
    2.1.3  實驗儀器
    2.1.4  主要實驗溶液及配製
  2.2  實驗方法
    2.2.1  類固醇合成相關?類基因全長cDNA的克隆
    2.2.2  測序結果的生物信息學分析
    2.2.3  實時熒光定量PCR引物的設計與合成
    2.2.4  qRT-PCR檢測稀有鮈鯽類固醇合成相關基因的組織表達特異性
  2.3  結果與分析
    2.3.1  總RNA的提取及檢測
    2.3.2  稀有鮈鯽StAR、cypllal、3β-HSD、cyp17al和11β-HSD2基因cDNA全長的克隆
    2.3.3  稀有鮈鯽類固醇合成相關基因cDNA全長的序列結構分析
    2.3.4  組織分佈
  2.4  討論
  2.5  小結
3  17α-甲基睾酮和乙炔雌二醇對稀有鮈鯽肝臟vtg2、類固醇合成相關基因mRNA表達以及性腺發育的影響
  3.1  實驗材料
    3.1.1  實驗動物
    3.1.2  儀器和藥品
  3.2  實驗方法
    3.2.1  MT和EE2暴露稀有鮈鯽
    3.2.2  生物學指標測量
    3.2.3  組織切片的製備與觀察

    3.2.4  總RNA的提取、檢測和反轉錄
    3.2.5  內參基因的篩選
    3.2.6  實時熒光定量PCR
    3.2.7  數據分析
  3.3  實驗結果
    3.3.1  MT和EE2對稀有鮈鯽生長發育的影響
    3.3.2  EE2暴露對稀有鮈鯽性腺的影響
    3.3.3  MT暴露對稀有鮈鯽性腺的影響
    3.3.4  內參基因篩選
    3.3.5  MT和EE2暴露后肝臟vig2基因的表達變化
    3.3.6  EE2和MT暴露稀有夠卿7d、14d和21d類固醇合成相關基因的表達變化
  3.4  討論
    3.4.1  MT和EE2對稀有鮈鯽生物學指標和性腺發育的影響
    3.4.2  MT和EE2對稀有鮈鯽肝臟vig2的影響
    3.4.3  MT和EE2對稀有鮈鯽性腺類固醇合成相關基因mRNA表達的影響
  3.5  小結
4  17α-甲基睾酮對稀有鮈鯽體內激素水平的影響
  4.1  實驗材料
    4.1.1  實驗動物
    4.1.2  實驗試劑
    4.1.3  實驗儀器
  4.2  實驗方法
    4.2.1  MT暴露稀有鮈鯽
    4.2.2  樣品採集
    4.2.3  全魚勻漿液的準備
    4.2.4  蛋白定量
    4.2.5  標準曲線的製作
    4.2.6  間接?聯免疫（ELISA）方法測定全魚E2、T和11-KT含量
    4.2.7  數據分析
  4.3  實驗結果
    4.3.1  ELISA標準曲線
    4.3.2  MT對稀有夠娜體內激素含量的影響
  4.4  討論
5  高通量測序分析MT對稀有鮈鯽性腺轉錄組的影響
  5.1  實驗材料
    5.1.1  稀有鮈鯽
    5.1.2  實驗試劑
    5.1.3  實驗儀器
    5.1.4  實驗溶劑及配製
  5.2  實驗方法
    5.2.1  MT暴露稀有鮈鯽
    5.2.2  總RNA的提取
    5.2.3  總RNA質量檢測
    5.2.4  稀有鮈鯽性腺cDNA文庫的構建、檢測及測序
    5.2.5  數據分析
  5.3  實驗結果
    5.3.1  性腺總RNA質量檢測
    5.3.2  性腺基因表達譜數據
    5.3.3  DGE序列分佈規律
    5.3.4  差異基因篩選

    5.3.5  MT誘導下性腺差異基因GO通路分析
    5.3.6  MT誘導下性腺差異基因KEGG通路分析
    5.3.7  實驗重複性分析
    5.3.8  qRT-PCR驗證
  5.4  討論
    5.4.1  稀有鮑螂卵母細胞成熟信號通路中的差異基因
    5.4.2  其他差異基因
  5.5  小結
參考文獻
縮略語
附錄1  實驗中所需的實驗試劑
附錄2  實驗中所需的實驗儀器
附錄3  主要實驗所需要的溶液及其配製
附錄4  Trizol一步法提取總RNA
附錄5  1%和2%濃度（m/v）瓊脂糖凝膠的配製
附錄6  反轉錄（DNA第一鏈合成）
附錄7  天澤基因公司DNA凝膠回收與純化試劑盒中的操作步驟
附錄8  感受態細胞的製備
附錄9  3'RACE System for Rapid Amplification of cDNA Ends（Invitrogen）說明書
附錄10  5'RACE System for Rapid Amplification of cDNA Ends（Invitrogen）說明書
附錄11  實時定量PCR 引物設計原則
附錄12  載玻片和蓋玻片的清洗
附錄13  組織切片製備過程中的染色
附錄14  魚雌二醇（E2）?聯免疫分析
附錄15  魚睾酮（T）?聯免疫分析
附錄16  魚11-酮基睾酮（11-KT）?聯免疫分析
附錄17  稀有鮈鯽雌魚差異基因富集的78個KEGG信號通路
附錄18  稀有鮈鯽雄魚差異基因富集的89個KEGG信號通路
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