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基因工程--動物細胞製藥關鍵技術

  • 作者：王天雲//賈岩龍//楊贇|責編:趙玉清//李建麗
  • 出版社：化學工業
  • ISBN：9787122433237
  • 出版日期：2024/01/01
  • 裝幀：平裝
  • 頁數：376
人民幣：RMB 128 元      售價：元
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內容大鋼
    《基因工程——動物細胞製藥關鍵技術》圍繞動物細胞表達系統生產重組蛋白質藥物的關鍵技術，從動物細胞培養、動物細胞載體、目的基因導入、重組穩定細胞株篩選和評估、重組蛋白分離純化、重組蛋白藥物鑒定與分析、重組蛋白藥物新技術等方面，詳細介紹了該領域的關鍵技術及新技術。
    本書涵蓋了動物細胞製藥基因工程近年來的最新的關鍵技術及相關進展，可作為從事生物製藥、基因工程等領域工作的科研人員、專業技術人員及相關專業的教師和學生的參考用書。
作者介紹
王天雲//賈岩龍//楊贇|責編:趙玉清//李建麗
    王天雲，博士，教授，博士生導師，新鄉醫學院太行學者特聘教授。河南省重組藥物蛋白表達系統國際聯合實驗室及生物創新藥物工程技術研究中心主任，河南省生物化學與分子生物學會理事長，中國生物化學與分子生物學會理事。任教育部長江學者、國家科技進步獎評審專家。主持國家自然科學基金4項，省重大科技專項1項，創新傑出人才項目1項；參與國家「863」課題、國家重大科技專項各1項。獲省科技進步二等獎2項、三等獎1項。申請國家發明專利35項，已授權16項。發表研究論文86篇，其中SCI收錄53篇，被引1076次。長期從事哺乳動物細胞表達系統的研究，建立了高效的哺乳動物細胞表達系統，包括高效表達載體、細胞系及培養基。已實現技術轉移2項，專利轉化8項。
目錄
第一章  動物細胞培養
  第一節  動物細胞培養基礎知識
    一、基本概念
    二、動物細胞培養條件
    三、動物細胞培養實驗室
    四、無菌技術
  第二節  動物細胞培養技術
    一、動物細胞凍存與復甦
    二、動物細胞傳代
    三、動物細胞懸浮馴化及無血清培養
    四、動物細胞分批培養
    五、動物細胞補料分批培養
    六、動物細胞灌流技術培養
  第三節  動物細胞生物特性分析
    一、動物細胞生長曲線和倍增時間分析
    二、動物細胞增殖測定
    三、動物細胞凋亡檢測
    四、動物細胞周期檢測
  參考文獻
第二章  動物細胞載體
  第一節  質粒載體構建
    一、目的基因獲取
    二、限制性內切??切
    三、目的片段和載體連接
    四、重組子轉化
    五、重組載體篩選
    六、重組載體鑒定
  第二節  病毒載體構建
    一、桿狀病毒表達載體
    二、慢病毒載體
    三、腺病毒載體
    四、逆轉錄病毒載體
  參考文獻
第三章  目的基因導入
  第一節  動物細胞轉染
    一、脂質體轉染
    二、聚乙烯亞胺轉染
    三、電穿孔轉染
    四、影響細胞轉染的因素
  第二節  細胞轉染效率檢測
    一、流式細胞儀檢測
    二、熒光顯微鏡檢測
  參考文獻
第四章  重組穩定細胞株篩選和評估
  第一節  重組穩定細胞池篩選
    一、常用的抗生素篩選標記
    二、遺傳霉素篩選
    三、DHFR篩選
    四、GS篩選
  第二節  重組單克隆細胞株分離

    一、有限稀釋法
    二、流式細胞熒光分選技術
    三、ClonePix
    四、克隆環法
    五、其他篩選方法
  第三節  重組穩定細胞系評估
    一、細胞污染檢測
    二、細胞系鑒定
    三、外源基因整合分析
    四、重組蛋白表達分析
  參考文獻
第五章  重組蛋白分離純化
  第一節  重組蛋白純化策略及設備
    一、重組蛋白純化策略
    二、重組蛋白純化設備
  第二節  重組蛋白沉澱和膜分離技術
    一、蛋白質沉澱法
    二、膜分離技術
  第三節  重組蛋白分離色譜技術
    一、親和色譜法
    二、疏水色譜法
    三、凝膠過濾色譜法
    四、離子交換色譜法
    五、反相色譜法
  參考文獻
第六章  重組蛋白藥物鑒定與分析
  第一節  蛋白質理化特性
    一、分子量測定
    二、等電點與電荷異質性分析
    三、?圖分析
    四、氨基酸組成分析
    五、N端氨基酸測序
    六、C端氨基酸測序
    七、二硫鍵分析
    八、高級結構分析
  第二節  蛋白質含量分析
    一、凱氏定氮法
    二、Lowry法
    三、BCA法
    四、Bradford法
    五、紫外吸收法
    六、高效液相色譜法
  第三節  蛋白質純度分析
    一、宿主細胞蛋白殘留分析
    二、宿主細胞DNA殘留分析
    三、殘留抗生素檢測
    四、其他成分檢測
  第四節  糖基化修飾分析
    一、分離富集親和技術
    二、糖蛋白鑒定/糖基化位點的確定方法

    三、糖鏈結構分析
  第五節  生物學活性測定
    一、體外法評估
    二、體內法評估
  第六節  免疫化學特性分析
    一、親和力測定
    二、抗原結合表位測定
  參考文獻
第七章  重組蛋白藥物新技術
  第一節  人工智慧與蛋白藥物設計
    一、核?酸及蛋白質相關資料庫
    二、基因信息分析及密碼子優化
    三、蛋白質信息分析及結構預測
    四、人工智慧設計
  第二節  miRNA篩選與應用
    一、miRNA篩選
    二、miRNA應用
  第三節  基因編輯技術
    一、動物細胞CRISPR基因敲除
    二、動物細胞基因敲入
  第四節  表觀遺傳學技術
    一、DNA甲基化分析
    二、組蛋白修飾分析
    三、非編碼RNA分析
  第五節  DNA與蛋白質相互作用分析
    一、凝膠遷移實驗
    二、DNaseⅠ足跡實驗
    三、酵母單雜交系統
    四、染色質免疫沉澱
    五、噬菌體展示技術（DNA與蛋白質相互作用）
  參考文獻
附錄1  常用緩衝液及試劑的配製
附錄2  中英文辭彙表

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