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組織和細胞培養技術(供研究生及科研人員用第4版國家衛生健康委員會十三五規劃教材)/科研人員核心能力提升導引叢書

  • 作者:編者:劉玉琴|責編:賈艾莎
  • 出版社:人民衛生
  • ISBN:9787117316859
  • 出版日期:2021/09/01
  • 裝幀:平裝
  • 頁數:300
人民幣:RMB 129 元      售價:
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內容大鋼
    組織和細胞培養主要是一門技術性課程。因此,本教材始終注重對基本技能的訓練,且在「思想性、科學性、先進性和啟發性」的基礎上更加註重「適用性」。這在前3版中均有體現,本次修訂除了補充十分必要的理論進展之外,仍保持這一原則。期望研究生在學習組織和細胞培養技術之後,能夠真正成為一名熟練掌握這些技術的實踐者。

作者介紹
編者:劉玉琴|責編:賈艾莎
    劉玉琴,研究員,博士生導師,中國農工民主黨黨員。任《中華病理學雜誌》編委、國際細胞系質量認證委員會(ICLAC)委員。曾任中華醫學會病理學分會委員,中國病理牛理學會腫瘤專業委員會委員,中國抗癌協會腫瘤生物治療專業委員會委員,中國抗癌協會腫瘤轉移專業委員會常務委員等。長期從事腫瘤侵襲轉移的機制研究,強調腫瘤研究應從不同層次系統研究,如進行分子、細胞、體內、體外模型研究系統的聯合應用。近年來,以「癌細胞侵襲轉移、複發機制及預防措施」為研究方向,先後參與了20余項科研工作,建立了腫瘤複發轉移模型及腫瘤休眠模型,利用新型腫瘤疫苗治療腫瘤的複發/轉移,利用組織/基因晶元開展腫瘤轉移相關基因的尋找與驗證、腫瘤幹細胞特性研究等。曾獲得衛生部科學技術進步獎三等獎2次,已發表論文120余篇。主編及參加編寫專著20余部,包括《癌的侵襲與轉移基礎與臨床》《實驗細胞資源目錄》《細胞培養實驗手冊》《實驗細胞資源的描述標準與管理規範》等,以及全國高等學校醫學研究生教材《組織和細胞培養技術》(第3版),參加翻譯《人腫瘤細胞培養》《幹細胞生物學》《細胞治療》等;同時也是研究生課程實驗腫瘤學及組織培養的負責人。致力於實驗細胞資源的收集保藏和資源庫的運行管理。作為國家實驗細胞資源共享平台的負責人,全面負責平台建設及運行服務。平台開展實驗細胞資源的保藏及標準化整理、整合與共享;並已制定、完善了各種管理規章及標準操作規程。實驗室自建多種特殊細胞資源,包括6株中國人腎癌細胞、規律成簇間隔短迴文重複相關蛋白核酸?9(Cas9)穩定表達的170余株近20種腫瘤細胞、永生化的臍靜脈血管內皮細胞,以及多種熒光蛋白/熒光素?標記的細胞等。國家實驗細胞資源共享平台已為全國科研、教學、疾病預防控制機構和生物製藥企業提供資源實物服務10萬餘株次。

目錄
第一章  緒論
  第一節  組織培養的誕生與發展簡史
  第二節  組織培養的優點、局限性及發展方向
    一、組織培養的優點
    二、組織培養的局限性
    三、組織培養的可能發展方向
  第三節  組織培養常用術語
  第四節  組織培養常用縮寫詞
第二章  細胞培養基本條件
  第一節  細胞培養實驗室的建立
    一、實驗室設計原則與要求
    二、實驗室的布局
    三、細胞培養實驗室的基本設備
  第二節  培養儀器和材料
    一、常用儀器設備
    二、培養器皿與其他材料
    三、培養用品的清洗和消毒
  第三節  培養用液
    一、培養基
    二、其他培養用液
    三、細胞培養所用液體的滅菌與保存
第三章  細胞培養基本技術
  第一節  細胞傳代計數
    一、血細胞計數板
    二、電子計數儀
  第二節  細胞形態觀察
    一、顯微鏡觀察
    二、流式細胞儀技術
  第三節  細胞的凍存、復甦和運輸
    一、細胞的凍存
    二、細胞的復甦
    三、細胞的運輸
第四章  機體各種組織的體外原代培養
  第一節  上皮組織
    一、內皮細胞的培養
    二、單層柱狀上皮細胞的培養
    三、假復層纖毛柱狀上皮細胞的培養
    四、復層扁平上皮細胞的培養
  第二節  結締組織
    一、成纖維細胞的培養
    二、巨噬細胞的培養
    三、脂肪細胞的培養
    四、肥大細胞的培養
    五、血細胞的培養
    六、淋巴細胞的培養
    七、軟骨細胞的培養
    八、骨細胞的培養
  第三節  肌組織
    一、心肌細胞的培養
    二、平滑肌細胞的培養

    三、骨骼肌細胞的培養
  第四節  神經組織
    一、神經元的培養
    二、神經膠質細胞的培養
第五章  幹細胞培養
  第一節  胚胎幹細胞培養及鑒定
  第二節  神經幹細胞培養及鑒定
    一、胚胎和成年神經幹細胞的發育
    二、神經幹細胞的培養方式
  第三節  造血幹細胞
    一、造血幹細胞的定義及生物學特徵
    二、造血幹細胞的分離及培養
  第四節  間充質幹細胞
  第五節  表皮組織幹細胞
    一、人表皮幹細胞的培養
    二、表皮幹細胞的鑒定
    三、人毛囊幹細胞的培養
  第六節  誘導型幹細胞的建立及鑒定
第六章  器官培養
  第一節  器官培養的要求及特點
  第二節  器官培養的方法及應用
    一、固體培養基器官培養法
    二、液體培養基器官培養法
    三、動態器官培養法
    四、體內器官培養法
  第三節  三維細胞培養技術
    一、3D細胞培養技術的關鍵因素
    二、3D細胞培養方法
第七章  細胞建系和鑒定
  第一節  正常細胞系的建立和鑒定
    一、正常細胞系建立程序
    二、正常細胞系建立的例證
    三、建立正常細胞系的討論和小結
    四、正常細胞系的鑒定
    五、正常細胞系鑒定討論及小結
  第二節  腫瘤細胞系、轉化細胞系的建立和鑒定
    一、腫瘤細胞系的建立
    二、腎透明細胞癌細胞建系的例證
    三、轉化細胞系建立
    四、腫瘤細胞和轉化細胞建系討論和小結
    五、腫瘤細胞系和轉化細胞系的鑒定
第八章  培養細胞的質量控制
  第一節  培養細胞的微生物檢測
    一、培養細胞的無菌檢測
    二、培養細胞的支原體檢測
    三、培養細胞的病毒檢測
  第二節  培養細胞的種屬鑒定
    一、同工?法
    二、染色體法
    三、PCR法

  第三節  人源細胞的身份認定
第九章  培養細胞常用檢測分析
  第一節  細胞培養的生長測定
    一、細胞計數法
    二、台盼藍染色法
    三、MTT比色法
    四、CCK-8比色法
    五、細胞生長曲線法
    六、['H]-TdR摻入法
    七、BrdU摻入法
    八、細胞集落培養
  第二節  細胞周期分析
    一、細胞周期概述
    二、細胞周期調控
    三、細胞同步化方法
    四、細胞周期分析
  第三節  細胞運動、侵襲能力觀察
    一、吞噬軌跡法
    二、刮痕修復法
    三、Transwell法
  第四節  細胞衰老
    一、衰老相關B-半乳糖??活性檢測
    二、端粒長度的測定
    三、錯配修復基因的測定
    四、微衛星不穩定性的測定
  第五節  凋亡研究
    一、細胞凋亡的形態學研究方法
    二、細胞凋亡的生物化學研究方法
    三、細胞凋亡的免疫化學分析方法
    四、細胞凋亡的分子生物學研究方法
  第六節  細胞的基因修飾
    一、磷酸鈣沉澱法
    二、脂質體轉染
    三、電穿孔轉染技術
    四、病毒介導的基因轉移技術
    五、篩選細胞克隆
第十章  細胞融合與單克隆抗體製備
  第一節  單克隆抗體製備的基本原理
  第二節  小鼠-小鼠B淋巴細胞雜交瘤
    一、融合用細胞的製備
    二、細胞融合
    三、雜交瘤細胞的篩選
    四、特異抗體的檢測
    五、雜交瘤細胞的克隆化
    六、雜交瘤細胞的凍存
    七、單克隆抗體類型的鑒定
    八、單克隆抗體的大量製備
    九、小鼠單克隆抗體的純化
  第三節  大鼠-大鼠B淋巴細胞雜交瘤
    一、大鼠骨髓瘤細胞系

    二、大鼠B淋巴細胞的製備
    三、細胞融合
    四、大鼠單克隆抗體的生產
    五、大鼠單克隆抗體的提純
  第四節  人-人淋巴細胞雜交瘤
    一、人骨髓瘤細胞株和B淋巴母細胞瘤株
    二、人B淋巴細胞的製備
    三、細胞融合
    四、人單克隆抗體的生產
    五、人-人雜交瘤技術存在的問題
  第五節  兔-兔B淋巴細胞雜交瘤
    一、兔骨髓瘤細胞系
    二、兔B淋巴細胞的製備
    三、細胞融合
  第六節  單克隆抗體的改構優化
    一、人-鼠嵌合抗體
    二、小分子抗體
    三、雙特異性抗體
    四、展望
第十一章  工程細胞及其大規模培養
  第一節  細胞培養在生物製品中的應用
    一、生物製品的概念
    二、細胞培養在疫苗製備中的應用
  第二節  治療用細胞的培養及應用
    一、T細胞的培養與腫瘤的細胞治療
    二、幹細胞的培養及其在再生醫學中的應用
  第三節  細胞培養在生物工程中的應用
    一、大規模細胞培養方法
    二、大規模細胞培養的體系參數
    三、大規模細胞培養的工藝類型
第十二章  細胞培養常見問題解答
  第一節  細胞培養相關問題
  第二節  細胞培養液使用相關問題
  第三節  細胞培養血清使用常見問題
  第四節  細胞傳代常見問題
  第五節  細胞及培養液質量檢測相關問題
  第六節  細胞凍存復甦相關問題
附錄1  實驗室常用的細胞系(株)
附錄2  常用緩衝液
附錄3  其他緩衝液的配製
附錄4  常用人工合成細胞培養基
中英文名詞對照索引

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