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流式細胞術--原理操作及應用(第2版)

  • 作者:陳朱波//曹雪濤
  • 出版社:科學
  • ISBN:9787030390974
  • 出版日期:2014/01/01
  • 裝幀:平裝
  • 頁數:236
人民幣:RMB 88 元      售價:
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內容大鋼
    陳朱波、曹雪濤編著的《流式細胞術——原理、操作及應用(第2版)》主要介紹流式細胞術的原理、操作及應用,分為概述、流式細胞儀的原理、流式圖、流式細胞術的基本操作與技巧、流式分析術的應用和流式分選術的應用6個部分。概述部分介紹基本概念和幾款常見的流式細胞儀,原理部分具體介紹流式細胞儀的液流系統、光路系統、檢測分析系統和分選系統,流式圖部分主要介紹了流式通道、流式直方圖、流式散點圖和流式等高線圖;操作部分介紹了樣品製備、熒光素偶聯抗體及標記、光電倍增管電壓設定、對照設置、補償調節、閾值設定、死細胞問題處理、分選模式選擇、上樣速度控制、分選設門原則、分選基本步驟等內容。流式分析術的應用部分具體介紹了流式細胞術在免疫學方面的應用,並且擴展到基礎醫學和生物學方面的應用;流式分選術的應用部分闡述了不同條件下流式分選的策略選擇和注意事項,同時還介紹了各種幹細胞包括腫瘤幹細胞等的流式分選方法。
    本書特別適合於免疫學研究者和流式細胞術的初學者,也可以作為有一定經驗的操作者的參考書,對其他領域研究者也具有很好的參考價值。

作者介紹
陳朱波//曹雪濤
    曹雪濤,1964年出生,教授,中國工程院院士,現任南開大學校長,兼任中國醫學科學院免疫治療研究中心主任,醫學免疫學國案重點實驗室主任。德國科學院院士、美國國家醫學科學院院士、美國人文與科學院院士、英國醫學科學院院土、法國醫學科學院院士、亞洲大洋洲免疫學聯盟秘書長、中國生物醫學工程學會理事長。曾任第二軍醫大學副校長、中國醫學科學院北京協和醫學院院校長、中國免疫學會理事長、中國生命科學聯合體主席、全球慢性疾病防控聯盟主席。創辦《中國腫瘤生物治療雜誌》並任主編,《中華醫學雜誌》主編、Cellular Molecular Immunology共同主編,Cell、Immunity、eLife、Cell Research等編委。     主要從事天然免疫與炎症的基礎研究、腫瘤免疫治療轉化應用研究、醫學科學發展戰略研究。發現了數種新型免疫分子和新型免疫細胞亞群,揭示天然免疫識別與應答調控新型分子機制、提出炎症消退新觀點,鑒定了預測腫瘤轉移與患者預后的標誌物分子,建立了腫瘤免疫治療新途徑。部分研究結果發表于《細胞》《自然》《科學》《自然免疫學》等雜誌。曾經獲得教育部長江學者成就獎(2005)、中國工程院光華工程科技獎(2012)、中國科學院陳嘉庚科學獎(2016)。

目錄

第二版前言
第一版前言
1  概述
  1.1  流式細胞術基本概念
  1.2  分析型流式細胞儀介紹
  1.3  分選型流式細胞儀介紹
  參考文獻
2  流式細胞儀的原理
  2.1  液流系統
  2.2  光路系統
  2.3  檢測分析系統
  2.4  分選系統
  參考文獻
3  流式圖
  3.1  流式通道
  3.2  流式直方圖
  3.3  流式散點圖
  3.4  流式等高線圖
  參考文獻
4  流式細胞術的基本操作與技巧
  4.1  樣品製備
    4.1.1  獨立細胞樣品製備
    4.1.2  免疫器官樣品製備
    4.1.3  實體臟器樣品製備
  4.2  熒光素偶聯抗體及其標記方法
    4.2.1  熒光素
    4.2.2  熒光素偶聯抗體
    4.2.3  樣品封閉
    4.2.4  熒光素偶聯抗體標記
  4.3  光電倍增管電壓設定
  4.4  對照的設置
    4.4.1  陰性對照的設置
    4.4.2  FMO對照
    4.4.3  陽性對照的設置
  4.5  補償調節
    4.5.1  補償調節的原理
    4.5.2  調節補償的具體方法
    4.5.3  三色和四色分析補償調節方法
    4.5.4  影響補償大小的因素
  4.6  閾值設定
  4.7  流式分析中的死細胞問題
    4.7.1  減少樣品中死細胞比例的方法
    4.7.2  流式分析時區分死細胞和活細胞的方法
  4.8  流式分選模式選擇
    4.8.1  純化模式
    4.8.2  富集模式
    4.8.3  單細胞模式
  4.9  上樣速度控制
    4.9.1  流式分析速度控制

    4.9.2  流式分選速度控制
  4.10  分選設門基本原則
  4.11  流式分選基本步驟
  參考文獻
5  流式分析術的應用
  5.1  細胞群比例測定
  5.2  表型測定
  5.3  檢測細胞因子
    5.3.1  胞內染色法檢測細胞因子
    5.3.2  胞內染色法與ELISA法比較
    5.3.3  CBA法測定細胞因子
    5.3.4  CBA法與ELISA法比較
  5.4  檢測細胞增殖
    5.4.1  相對計數法
    5.4.2  示蹤染料標記法
    5.4.3  BrdU和EdU摻入法
    5.4.4  其他方法
  5.5  檢測細胞凋亡
    5.5.1  annexin V/PI雙染色法
    5.5.2  SYTO/PI雙染色法
    5.5.3  細胞DNA含量分析法檢測細胞凋亡
    5.5.4  線粒體損傷檢測法
    5.5.5  活化的caspase—3檢測法
    5.5.6  熒光素偶聯的caspase抑製劑(FLICA)標記法
    5.5.7  甲?胺誘導ssDNA單抗檢測法
    5.5.8  TUNEL法
  5.6  檢測細胞周期
    5.6.1  非特異性核酸熒光染料標記法
    5.6.2  特異性細胞周期調節蛋白檢測法
  5.7  檢測細胞殺傷能力
  5.8  檢測細胞吞噬功能
  5.9  檢測胞內活化的激?
  5.10  檢測細胞自噬
  5.11  檢測基因表達
    5.11.1  GFP報告基因系統
    5.11.2  lacZ報告基因系統
    5.11.3  β—內?胺?報告基因系統
    5.11.4  新型膜結合型報告分子系統
  5.12  檢測細胞內兩種蛋白質的直接結合
    5.12.1  熒光共振能量轉移結合流式細胞術檢測兩種蛋白質的直接結合
    5.12.2  雙分子熒光互補結合流式細胞術檢測兩種蛋白質的直接結合
  5.13  微生物學中的應用
    5.13.1  熒光素偶聯抗體直接檢測法
    5.13.2  抗體結合人工熒光微球直接檢測法
    5.13.3  微生物活性流式檢測
    5.13.4  人工微球熒光免疫試驗檢測抗體
    5.13.5  熒光原位雜交流式檢測法
    5.13.6  PCR免疫微珠法
    5.13.7  原位PCR雜交流式檢測法
  5.14  檢測鈣相關分子

    5.14.1  檢測細胞內遊離的鈣離子水平
    5.14.2  檢測鈣蛋白?活性
    5.14.3  檢測細胞膜鈣泵活性
  5.15  表觀遺傳學中的應用
    5.15.1  ChIP—on—beads法
    5.15.2  檢測細胞水平組蛋白修飾情況
  5.16  檢測縫隙連接介導的細胞通訊
  5.17  檢測細胞內pH值和鈉氫轉運體活性
    5.17.1  檢測細胞內pH值
    5.17.2  檢測鈉氫轉運體活性
  5.18  其他應用
    5.18.1  檢測活性氧簇
    5.18.2  檢測細胞內遊離的鋅離子水平
    5.18.3  檢測端粒長度
    5.18.4  檢測脂筏結合蛋白
  引文目錄
  參考文獻
6  流式分選術的應用
  6.1  流式分選與磁性分選
  6.2  流式分選獨立群體細胞
  6.3  流式分選非獨立細胞群體
  6.4  流式分選低比例細胞群體
    6.4.1  強勢細胞群的輻射影響
    6.4.2  流式分選結合磁性分選
    6.4.3  二次分選法
  6.5  流式分選幹細胞
    6.5.1  流式分選造血幹細胞
    6.5.2  流式分選側群幹細胞
    6.5.3  流式分選間充質幹細胞
    6.5.4  流式分選腫瘤幹細胞
  參考文獻

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