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乳酸菌誘導結腸癌細胞凋亡機制研究

  • 作者：王淑梅
  • 出版社：中國農業科技
  • ISBN：9787511640536
  • 出版日期：2019/06/01
  • 裝幀：平裝
  • 頁數：150
人民幣：RMB 38 元      售價：元
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內容大鋼
    本專著以本實驗室人員從中國西部地區傳統發酵食品及嬰兒、成人糞便中分離出的乳酸菌為供試菌株，以標準菌株Lactobacillus rhamnosus GG（ATCC 43121，USA）為陽性對照菌株，篩選出具有益生功能（包括黏附於腸上皮細胞能力、耐受模擬胃液和模擬腸液能力），又具有顯著抑制人結腸癌HT-29細胞增殖能力的4株乳酸菌（M5、X11、X12和K14）。再經過抗癌功能篩選，最終獲得菌株X12、M5的細胞壁能顯著誘導HT-29細胞DNA損傷和凋亡，並深入探討其誘導結腸癌細胞凋亡的機理。
作者介紹
王淑梅
目錄
第一章  結腸癌及乳酸菌功能關係概述
  第一節  引言
    一、結腸癌簡介
    二、結腸癌發病癥狀
    三、乳酸菌抑制結腸癌的可能途徑
  第二節  人結腸癌的發病原因
    一、結腸癌發病原因簡述
    二、環境化學物質誘發的結腸癌
    三、飲食因素誘發的結腸癌
    四、細菌?誘發的結腸癌
  第三節  乳酸菌調控機體免疫功能
    一、乳酸菌對非特異性免疫功能的影響
    二、乳酸菌對特異性免疫功能的影響
    三、乳酸菌激活機體的抗腫瘤免疫
第二章  乳酸菌抗結腸癌功能研究進展
  第一節  乳酸菌抗結腸癌作用的機理
    一、乳酸菌降低食源性致癌物質的毒性
    二、乳酸菌抑制癌細胞生長及誘導癌細胞凋亡
    三、乳酸菌對潛在致癌物質致癌作用的阻斷
    四、乳酸菌對飲食誘髮結腸癌作用的阻斷
  第二節  乳酸菌不同菌體成分抗結腸癌作用機理
    一、乳酸菌的菌體細胞抗結腸癌作用研究
    二、乳酸菌的菌體細胞壁抗結腸癌作用研究
    三、乳酸菌的菌體細胞質抗結腸癌作用研究
    四、乳酸菌的菌體代謝產物抗結腸癌作用研究
  第三節  乳酸菌與線粒體凋亡信號途徑
    一、活性氧族
    二、線粒體凋亡途徑
  第四節  國內開展的課題相關研究
第三章  乳酸菌抗腫瘤研究技術方法
  第一節  乳酸菌抗腫瘤研究設施、材料
    一、實驗儀器與設備
    二、實驗所用試劑與藥品
    三、實驗所用菌株與細胞
    四、實驗用培養液
  第二節  乳酸菌抗腫瘤研究檢測方法
    一、對結腸癌細胞增殖抑制能力的測定
    二、乳酸菌對人腸道上皮細胞黏附性能的測定
    三、乳酸菌對酸耐受能力的測定
    四、乳酸菌對膽鹽耐受能力的測定
    五、乳酸菌16S rDNA的鑒定
    六、蛋白濃度的測定
    七、乳酸菌?聚糖分子量的檢測
    八、乳酸菌?聚糖氨基酸組成分析
    九、乳酸菌菌體和?聚糖的形態學觀察
    十、HT-29細胞毒性的測定
    十一、HT-29細胞形態學觀察
    十二、HT-29細胞DNA損傷的測定
    十三、HT-29細胞凋亡與壞死的測定
    十四、HT-29細胞周期的測定

    十五、HT-29細胞線粒體膜電位的測定
    十六、HT-29細胞ROS的檢測
    十七、HT-29細胞線粒體和胞漿中細胞色素c的檢測
    十八、HT-29細胞總RNA的提取
    十九、體外反轉錄合成及RT-PCR反應
    二十、HT-29細胞總蛋白提取與蛋白含量的測定
    二十一、HT-29細胞總蛋白的SDS聚丙烯?胺凝膠電泳
    二十二、Western blot分析
第四章  乳酸菌抗腫瘤核心技術研究
    一、抗結腸癌功能乳酸菌菌株的體外篩選
    二、抗結腸癌功能乳酸菌菌體成分的篩選
    三、乳酸菌?聚糖對HT-29細胞的抑製作用
    四、乳酸菌?聚糖誘導HT-29細胞凋亡途徑的研究
    五、乳酸菌?聚糖誘導HT-29細胞凋亡線粒體途徑研究
    六、數據處理及統計分析
第五章  抗結腸癌功能乳酸菌的篩選
  第一節  引言
  第二節  基於抑制HT-29細胞增殖能力篩選抗結腸癌乳酸菌
  第三節  基於乳酸菌的益生功能篩選抗結腸癌功能乳酸菌
    一、乳酸菌黏附於腸上皮細胞的能力
    二、乳酸菌對模擬胃液的耐受能力
    三、乳酸菌對模擬小腸液的耐受能力
  第四節  乳酸菌菌種鑒定
  第五節  本章小結
第六章  抗結腸癌功能乳酸菌菌體成分的篩選
  第一節  引言
  第二節  乳酸菌細胞壁和細胞質的提取及蛋白含量測定
    一、考馬斯亮藍G-250標準曲線
    二、乳酸菌細胞壁和細胞質蛋白質濃度計算
  第三節  基於抑制HT-29細胞增殖能力篩選乳酸菌菌體成分
    一、乳酸菌細胞壁和細胞質對HT-29細胞增殖的抑制
    二、乳酸菌細胞壁和細胞質對HT-29細胞的毒性作用
  第四節  基於誘導HT-29細胞：DNA損傷篩選乳酸菌菌體成分
    一、單細胞凝膠電泳實驗
    二、瓊脂糖凝膠電泳實驗
  第五節  基於誘導HT-29細胞凋亡篩選乳酸菌菌體成分
    一、乳酸菌細胞壁和細胞質誘導HT-29細胞的凋亡
    二、乳酸菌細胞壁和細胞質對HT-29細胞膜電位的影響
    三、乳酸菌細胞壁和細胞質對HT-29細胞周期的影響
    四、乳酸菌細胞壁和細胞質對HT-29細胞形態學的影響
  第六節  乳酸菌細胞壁對正常細胞毒性影響
  第七節  本章小結
第七章  乳酸菌?聚糖對HT-29細胞抑製作用
  第一節  引言
  第二節  乳酸菌?聚糖對HT-29細胞增殖的抑制
    一、5-氟尿嘧啶對HT-29的毒性作用
    二、MTT實驗
    三、台盼藍染色實驗
  第三節  乳酸菌?聚糖理化性質分析
    一、乳酸菌?聚糖蛋白含量的測定

    二、乳酸菌?聚糖分子量的測定
    三、乳酸菌?聚糖氨基酸組成及含量
    四、掃描電鏡觀察乳酸菌?聚糖形態
    五、透射電鏡觀察乳酸菌?聚糖形態
  第四節  乳酸菌?聚糖誘導HT-29細胞凋亡
    一、HE染色
    二、Hoechst熒光染色
    三、透射電鏡觀察乳酸菌?聚糖誘導HT-29細胞線粒體的損傷
    四、乳酸菌?聚糖對HT-29細胞周期的影響
    五、乳酸菌?聚糖誘導HT-29細胞凋亡
  第五節  乳酸菌?聚糖對正常細胞毒性影響
  第六節  本章小結
第八章  ?聚糖誘導HT-29細胞凋亡途徑研究
  第一節  引言
  第二節  乳酸菌?聚糖對HT-29細胞凋亡相關基因的影響
    一、HT-29細胞總RNA的提取
    二、乳酸菌?聚糖對HT-29細胞凋亡相關基因的影響
    三、乳酸菌?聚糖對HT-29細胞Cyto-C基因表達的影響
  第三節  乳酸菌?聚糖誘導HT-29細胞凋亡機制研究
    一、乳酸菌?聚糖誘導HT-29細胞線粒體膜電位的損失
    二、乳酸菌?聚糖誘導HT-29細胞ROS的堆積
    三、乳酸菌?聚糖誘導HT-29細胞線粒體Cyto-C的釋放
    四、乳酸菌?聚糖誘導HT-29細胞凋亡相關蛋白的變化
  第四節  本章小結
總結
展望
參考文獻

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